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High-fidelity Cas13 variants for targeted RNA degradation with minimal collateral effects | Nature BiotechnologyCRISPR/Cas13系统是操作RNA的可编程工具,用于各种RNA靶向应用。在Cas13家族中,Cas13d是哺乳动物细胞中最活跃的亚型。最近,Cas13d被用作针对不同人类RNA病毒的抗病毒药物。然而,Cas13d在哺乳动物细胞...
Full article: Programmable RNA targeting with CRISPR-Cas13RNA靶向CRISPR-Cas13系统实现了内源RNA的精确工程,大大推进了我们对RNA调控的理解和基于RNA的诊断和治疗应用的开发。本文旨在总结基于Cas13的RNA靶向工具及其应用,讨论现有工具的局限性和挑战,并为RNA靶向系统的进一步发展提出潜在的方向。作为可编程核糖核酸...
https://doi.org/10.1080/15476286.2021.1899500长非编码RNA(lnc RNA)由于其在多种生物过程和疾病中的意义而日益成为研究的焦点。然而,大多数lncRNAs丰度低,保守性差,给功能研究带来了挑战。CRISPR/Cas系统是过去十年中出现的一项创新技术,可以用来进一步了解lncRNA的功能。该系统通过指导RNA (gRNA)和Cas核酸酶复合物靶...
名称:BL21(DE3) -wcaC敲除菌株货号:EC1043规格:200ul 甘油菌,2 支保存:-80℃抗性:无培养基:LB培养温度:37℃简介:本产品是用 Red 系统敲除大肠杆菌 BL21(DE3)中wcaC基因得到的单基因敲除菌株。实验中引入的质粒和抗性均已清除,培养条件与野生型 BL21(DE3)一致。基因型:E.coli str.BF–ompT gal dcm lon hsdSB&nbs...
名称:BL21(DE3) -wcaJ敲除菌株货号:EC1042规格:200ul 甘油菌,2 支保存:-80℃抗性:无培养基:LB培养温度:37℃简介:本产品是用 Red 系统敲除大肠杆菌 BL21(DE3)中wcaJ基因得到的单基因敲除菌株。实验中引入的质粒和抗性均已清除,培养条件与野生型 BL21(DE3)一致。基因型:E.coli str.BF–ompT gal dcm lon hsdSB&nbs...
原文:CoCas9 is a compact nuclease from the human microbiome for efficient and precise genome editing | Nature CommunicationsCRISPR-Cas工具箱的扩展对于加速遗传疾病疗法的开发非常必要。在这里,通过检索大规模扩展的宏基因组组装基因组库(主要来自人类微生物组),我们发现了II型CRISPR-Cas基因座的大量变种(n...
recA基因敲除的现货菌株上市啦!!名称:BL21(DE3) -recA敲除菌株货号:EC1038规格:200ul 甘油菌,2 支保存:-80℃抗性:无培养基:LB培养温度:37℃简介:本产品是用 Red 系统敲除大肠杆菌 BL21(DE3)中recA 基因得到的单基因敲除菌株。实验中引入的质粒和抗性均已清除,培养条件与野生型 BL21(DE3)一致。基因型:E.coli s...
名称:BL21(DE3) -recA敲除菌株货号:EC1038规格:200ul 甘油菌,2 支保存:-80℃抗性:无培养基:LB培养温度:37℃简介:本产品是用 Red 系统敲除大肠杆菌 BL21(DE3)中recA 基因得到的单基因敲除菌株。实验中引入的质粒和抗性均已清除,培养条件与野生型 BL21(DE3)一致。基因型:E.coli str.BF–ompT gal dcm lon hsdSB (r...
Cas9通常被引入细胞系以实现CRISPR–Cas9介导的基因组编辑。作者研究了Cas9表达对细胞的基因组和转录活动遗传和转录活动产生的影响。165对人类癌细胞系及其Cas9表达衍生物的基因表达谱显示,Cas9导入后p53途径的上调,特别是在野生型TP53(TP53-WT)细胞系中。这在mRNA和蛋白质水平上得到了证实。此外,在表达Cas9的细胞系中...
为了改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统的降低脱靶效应常常需要牺牲其强大的靶上编辑效率。为了同时提高准确性和效率,作者研发了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白。实验显示将两种嵌合蛋白的预组装的核糖核蛋白复合物转染到人或植物细胞中可将靶向基因编辑效率提高600%,而脱靶效应没有显著增加。两...
一、试剂准备1、Cas9过表达慢病毒载体选择。货号名称CR2001pLV-Cas9-PuroCR2002pLV-Cas9-NeoCR2003pLV-Cas9Nick-PuroCR2004pLV-Cas9Nick-Neo我们现提供4种表达Cas9 蛋白的慢病毒载体,您可以根据抗生素要求和基因敲除实验设计进行选择。 1)抗生素选择:Puromycin或G418 用嘌呤霉素筛选比较快,仅需4-7天即筛选...
摘要改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统以降低脱靶效应的努力主要是以牺牲其强大的靶上效率为代价的。为了提高准确性和效率,我们创建了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白,并证明了将两种嵌合蛋白的预组装核糖核蛋白转染到人或植物细胞中导致更高的靶向诱变效率,高达600%,而脱靶效应没有显著增加。...
一项微观上的发现不仅能让科学家们了解我们周围的微生物世界,还能提供一种控制CRISPR-Cas生物技术的新方法。在一项新的研究中,新西兰奥塔哥大学的Peter Fineran教授和丹麦哥本哈根大学的R一项微观上的发现不仅能让科学家们了解我们周围的微生物世界,还能提供一种控制CRISPR-Cas生物技术的新方法。在一项新的研究中,新西...
T细胞用于过继细胞治疗(ACT)以靶向和杀死癌细胞。在ACT中,嵌合抗原受体(CAR) T细胞在血癌中显示出临床疗效,但在实体瘤中效果不佳。这种疗效差异的部分原因是肿瘤促进了T细胞的衰竭,在这种情况下,细胞在主动杀死癌症方面的效果较差。科学家们表明,他们可以精确地中断分化过程的流动,从而提高抗肿瘤功效。“T细胞是肿瘤...
CRISPR-Cas系统为基础研究和临床转化应用中正展现出强大的实力和无穷的潜力,其中应用最为广泛的SpCas9系统能与sgRNA形成复合物切割靶位点引入DNA双链断裂(DSBs),之后由非同源重组修复(NHEJ)途径诱导插入缺失突变,或在DNA修复模板的存在下通过同源重组修复(HDR)途径实现精准基因编辑。此外,以CRISPR-Cas9为基础的各...