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货号:PC1400 本产品主要用于CRISPR/Cas9系统体外酶切实验、CRISPR靶点筛选等实验。可以在体外切割PCR产物、质粒等双链DNA。 试剂盒中提供了Cas9蛋白体外酶切所需试剂,包括原核表达的Cas9蛋白(来自Steptococcus pyogenes),反应缓冲液,以及对照sgRNA及其底...
服务编号:W3211 大肠杆菌(Escherichia coli)是最重要的模式生物之一。我们的大肠杆菌基因编辑服务采用CRISPR/Cas9技术,可以实现单个基因敲除、多个基因敲除、基因敲入、定点突变等。大概2-3周可以完成整个实验。基因编辑不残留任何抗性基因等编辑痕迹。...
本细胞株产品是用两个慢病毒感染后,用抗生素筛选得到的稳定多克隆细胞株。用到的两个慢病毒载体分别为:pLV-dCas9-VP64-Bsd:表达无DNA酶活性的dCas9蛋白与转录激活因子VP64的融合蛋白。该融合蛋白与sgRNA结合后,将定位于细胞基因组DNA的特定位置,并产生转录激活作用。pLV-dCas9-VP64-Bsd慢病毒载体表达Bsd抗性基因,转染细胞后,可以用Blasticidin筛选阳性细胞株。pLV-MPH-Hygro:表达MS2/P65/HSF1融合蛋白。与sgRNA结合并协同产生转录激活作用。pLV-MPH-Hygro慢病毒载体表达Hygromycin抗性基因。CRISPR-SAM采用无DNA切割活性的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白,加上能与MS2蛋白结合的sgRNA2.0,特异性识别并结合含sgRNA靶点的启动子。MS2蛋白连接p65和HSF1转录激活蛋白(MPH融合蛋白)。通过多种转录激活蛋白的协同作用,能更好的摸底细胞内转录激活。Hela-dCas9-VP64-MPH细胞稳定表达dCas9-VP64融合蛋白和MPH融合蛋白。只需要转入配套的sgRNA表达质粒或者人工合成的sgRNA就能实现基因特异性转录激活。...
Deep learning and CRISPR-Cas13d ortholog discovery for optimized RNA targeting - ScienceDirect需要有效和精确的哺乳动物转录组工程技术来加速生物发现和RNA治疗。尽管可编程CRISPR-Cas13核糖核酸酶有希望,但由于对指导RNA设计规则和脱靶或侧链RNA切割导致的细胞毒性的不完全了解,它们的实用性受到了阻碍。在这里,我...
Precise RNA targeting with CRISPR–Cas13d | Nature BiotechnologyCas13的的侧枝RNA降解的可能性引起了对转录组扰动,影响CRISPR–cas 13的治疗应用。研究表明,侧枝活性只发生在高RfxCas13d表达的情况下。在转录组规模和组合池筛选中使用低拷贝RfxCas13d,我们实现了高靶向敲除,而没有广泛的侧枝活动。此外,对高保真Ca...
品名: CAL 27-Luci细胞 货号: CL009 包装: 110^6~110^7 1支 细胞株类型: 稳定表达Luciferase(萤火虫荧光素酶)多克隆细胞株 原始细胞: CAL 27(人鱗狀細胞癌细胞) 表达基因: Luciferase 抗性: 嘌呤霉素 培养基: MEM培养基+10%FBS 消化液: 0.25%胰...
品名: CAL 27-Luci细胞 货号: CL009 包装: 110^6~110^7 1支 细胞株类型: 稳定表达Luciferase(萤火虫荧光素酶)多克隆细胞株 原始细胞: CAL 27(人鱗狀細胞癌细胞) 表达基因: Luciferase 抗性: 嘌呤霉素 培养基: MEM培养基+10%FBS 消化液: 0.25%胰...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。 pCas9/gRNA3载体 需要成对发挥作用。我们根据 pTYNE载体 设计构建了 pCas9/gRNA3 阳性对照载体 pCAS9-Pf、pCas9-Pr 。由...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据pTYNE载体上错码的EGFP的上游区域设计并构建了Cas9蛋白基因敲除实验的阳性对照gRNA表达载体pGR-Hygro-P。 pTYNE...
实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...
一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene(用水配制为6mg/ml,-20℃冻存)。 3.Cas9表达慢病毒。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染病毒时细胞密度在80%左右。 2、取出...
pCas9/gRNA1 货号:CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除,通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA,实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当,而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...
pCas9/gRNA3载体用于动物细胞基因敲除。该载体表达的Cas9Nickase蛋白是野生Cas9蛋白的D10A突变体。...
pLV-Cas9-Puro 货号: CR2001 载体类型: Cas9 蛋白慢病毒表达载体 原始载体: pLV-Puro 原核抗性:氨苄青霉素 真核抗性:嘌呤霉素 过表达基因: Cas9 蛋白 克隆酶切位点: EcoRI , BamHI 插入基因大小: 4164bp 使用说明: 1、 用于构建稳定表达 Cas9 蛋白...