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摘要改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统以降低脱靶效应的努力主要是以牺牲其强大的靶上效率为代价的。为了提高准确性和效率,我们创建了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白,并证明了将两种嵌合蛋白的预组装核糖核蛋白转染到人或植物细胞中导致更高的靶向诱变效率,高达600%,而脱靶效应没有显著增加。...
一项微观上的发现不仅能让科学家们了解我们周围的微生物世界,还能提供一种控制CRISPR-Cas生物技术的新方法。在一项新的研究中,新西兰奥塔哥大学的Peter Fineran教授和丹麦哥本哈根大学的R一项微观上的发现不仅能让科学家们了解我们周围的微生物世界,还能提供一种控制CRISPR-Cas生物技术的新方法。在一项新的研究中,新西...
T细胞用于过继细胞治疗(ACT)以靶向和杀死癌细胞。在ACT中,嵌合抗原受体(CAR) T细胞在血癌中显示出临床疗效,但在实体瘤中效果不佳。这种疗效差异的部分原因是肿瘤促进了T细胞的衰竭,在这种情况下,细胞在主动杀死癌症方面的效果较差。科学家们表明,他们可以精确地中断分化过程的流动,从而提高抗肿瘤功效。“T细胞是肿瘤...
CRISPR-Cas系统为基础研究和临床转化应用中正展现出强大的实力和无穷的潜力,其中应用最为广泛的SpCas9系统能与sgRNA形成复合物切割靶位点引入DNA双链断裂(DSBs),之后由非同源重组修复(NHEJ)途径诱导插入缺失突变,或在DNA修复模板的存在下通过同源重组修复(HDR)途径实现精准基因编辑。此外,以CRISPR-Cas9为基础的各...
产品说明:LbCpf1-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Lachnospiraceae bacterium的野生型Cas12a蛋白,蛋白C端添加了NLS信号肽。Cas12a-NLS蛋白高度纯化,可以用于体外切割DNA,也可用于细胞基因编辑。LbCpf1-NLS同时具有DNA和RNA内切酶活性。CRISPR/LbCpf1的初级转录产物pre-crRNA由LbCpf1自身加工,不需要tracrR...
CIRSPR/Cas9是一种在单条guide RNA(gRNA)的指导下利用Cas9核酸酶对靶标DNA进行特异性识别和切割的技术。该过程涉及到Cas9/gRNA与双链DNA(dsDNA)非特异性的结合、在dsDNA上搜索并识别PAM位点、通过与PAM上游的同源匹配形成RNA/DNA异源双链从而实现在dsDNA上靶点区域的特异性结合和切割。由于Cas9可以高效快捷地靶向并切割...
spCas9-NLS蛋白6折优惠啦!!!产品说明spCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。spCas9-NLS蛋白高度纯化,可以用于体外切割,也可用于细胞基因编辑。spCas9-NLS可以在体外与gRNA稳定结合,将Cas9/gRNA复合物通过电转或者转染试剂转染进入细胞即可直接对细...
spCas9-NLS蛋白6折优惠啦!!!产品说明spCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。spCas9-NLS蛋白高度纯化,可以用于体外切割,也可用于细胞基因编辑。spCas9-NLS可以在体外与gRNA稳定结合,将Cas9/gRNA复合物通过电转或者转染试剂转染进入细胞即可直接对细...
最近发表在《 基因 组生物学》上的研究发现了几个新的CRISPR-Cas12a位点,这是一种用于编辑哺乳动物 基因组 的CRISPR-Cas系统。本文的两位作者,李伟和滕飞,向我们介绍了他们的研究,以及如何增强和扩展基因组编辑工具箱。 在短短几年内,一项被称为CRISPR...
仅需体外合成sgRNA+PCR切割模板,无需载体构建和测序就能实现对靶点进行检测。即使零经验的师弟师妹们也能在2-3天内完成从实验材料准备到得到靶点切割结果。 spCas9体外酶切试剂盒:快速进行靶点筛选 酶切仅需30min 高效检测靶点 快速展开实验 显著提高基因...
2017年3月11日/ 生物谷 BIOON/---在一项新的研究中,来自美国伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校的微生物学教授Bill Metcalf和博士后研究员Dipti Nayak首次记录了在古生菌(Archaea,也译作古 细菌 ,或古菌)中使用CRISPR-Cas9介导的基因组编辑。他们的突破性工作...
RISPR/Cas9 技术极大方便了基因编辑的操作。利用 CRISPR/Cas9 进行基因编辑,其基本原理为:第一步先对需要编辑的位点进行切割,造成 DNA 断裂;第二步用细胞的 DNA 修复机制对 DNA 断裂点进行修复。从而产生需要的突变结果。 目前主要有两种方式进行基因敲...
在CRISPR成为基因组编辑的超级巨星之前,它还有一个基本功能,那就是保护细菌免受噬菌体的入侵。如今,研究人员决定以其人之道还治其人之身,希望用CRISPR来解决日益突出的抗生素耐药性问题,并试图改造人类的微生物组。 回归天然 Rodolphe Barrangou是北卡...
来自洛克菲勒大学的研究人员报告称,他们利用CRISPR/Cas9成功地有效引入了特异的纯合子和杂合子突变。这一突破性的成果发布在4月27日的《自然》(Nature)杂志上。 细菌CRISPR/Cas9系统使得人们能够在许多生物中实现序列特异性的基因编辑,有望成为在人类多...
本报记者聂翠蓉综合外电 今日视点 在近日举行的美国癌症研究协会年会上,美国冷泉港实验室癌症生物学家杰森谢尔泽陈述了他和同事最近的一项失败科研案例:备受瞩目的CRISPR/Cas9基因编辑技术中断了他们堪称完美的研究计划。 CRISPR/Cas9基因编辑技术示意图。...