货号：PC1400 本产品主要用于CRISPR/Cas9系统体外酶切实验、CRISPR靶点筛选等实验。可以在体外切割PCR产物、质粒等双链DNA。 试剂盒中提供了Cas9蛋白体外酶切所需试剂，包括原核表达的Cas9蛋白(来自Steptococcus pyogenes)，反应缓冲液，以及对照sgRNA及其底...

服务编号：W3211 大肠杆菌（Escherichia coli）是最重要的模式生物之一。我们的大肠杆菌基因编辑服务采用CRISPR/Cas9技术，可以实现单个基因敲除、多个基因敲除、基因敲入、定点突变等。大概2-3周可以完成整个实验。基因编辑不残留任何抗性基因等编辑痕迹。...

本细胞株产品是用两个慢病毒感染后，用抗生素筛选得到的稳定多克隆细胞株。用到的两个慢病毒载体分别为：pLV-dCas9-VP64-Bsd：表达无DNA酶活性的dCas9蛋白与转录激活因子VP64的融合蛋白。该融合蛋白与sgRNA结合后，将定位于细胞基因组DNA的特定位置，并产生转录激活作用。pLV-dCas9-VP64-Bsd慢病毒载体表达Bsd抗性基因，转染细胞后，可以用Blasticidin筛选阳性细胞株。pLV-MPH-Hygro：表达MS2/P65/HSF1融合蛋白。与sgRNA结合并协同产生转录激活作用。pLV-MPH-Hygro慢病毒载体表达Hygromycin抗性基因。CRISPR-SAM采用无DNA切割活性的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白，加上能与MS2蛋白结合的sgRNA2.0，特异性识别并结合含sgRNA靶点的启动子。MS2蛋白连接p65和HSF1转录激活蛋白（MPH融合蛋白）。通过多种转录激活蛋白的协同作用，能更好的摸底细胞内转录激活。Hela-dCas9-VP64-MPH细胞稳定表达dCas9-VP64融合蛋白和MPH融合蛋白。只需要转入配套的sgRNA表达质粒或者人工合成的sgRNA就能实现基因特异性转录激活。...

实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ，该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...

实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。 pCas9/gRNA3载体 需要成对发挥作用。我们根据 pTYNE载体 设计构建了 pCas9/gRNA3 阳性对照载体 pCAS9-Pf、pCas9-Pr 。由...

实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据pTYNE载体上错码的EGFP的上游区域设计并构建了Cas9蛋白基因敲除实验的阳性对照gRNA表达载体pGR-Hygro-P。 pTYNE...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染病毒时细胞密度在80%左右。 2、取出...

pCas9/gRNA1 货号：CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除，通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA，实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当，而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...

pCas9/gRNA3载体用于动物细胞基因敲除。该载体表达的Cas9Nickase蛋白是野生Cas9蛋白的D10A突变体。...

pLV-Cas9-Puro 货号： CR2001 载体类型： Cas9 蛋白慢病毒表达载体 原始载体： pLV-Puro 原核抗性：氨苄青霉素 真核抗性：嘌呤霉素 过表达基因： Cas9 蛋白 克隆酶切位点： EcoRI ， BamHI 插入基因大小： 4164bp 使用说明： 1、 用于构建稳定表达 Cas9 蛋白...

style type=text/css !-- .STYLE1 { color: #FF0000; font-weight: bold; } .STYLE2 {color: #FF0000} -- /style pstrong货号：/strongstrongC1203/strongbr strong培养基：/strongDMEM高糖培养基+10%胎牛血清 br strong消化液：/strong0.25%胰蛋白酶，0.53m...

货号：C1204 培养基：DMEM 高糖培养基+10%胎牛血清 消化液：0.25%胰蛋白酶，0.53mMEDTA 冻存液：50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO 培养条件：37℃，5%CO 2 细胞简介： 293T‐Cas9Nick 细胞是用 HEK293T 细胞构建的稳定表达 Cas9 蛋白的细胞株。在转入 gRNA 表...

一、试剂准备 1、Cas9过表达慢病毒载体选择。 货号 名称 CR2001 pLV-Cas9-Puro CR2002 pLV-Cas9-Neo CR2003 pLV-Cas9Nick-Puro CR2004 pLV-Cas9Nick-Neo 我们现提供4种表达Cas9 蛋白的慢病毒载体，您可以根据抗生素要求和基因敲除实验设计进行选择。 1）抗生...

使用时pEGFP/puro与pCas9/gRNA1载体或者pCas9/gRNA3载体共转染，用荧光标签或者嘌呤霉素对转染后的细胞进行初步筛选，可以显著提高基因敲除成功细胞的阳性率，减少后续细胞克隆检测数量。这个步骤对于转染效率较低的细胞尤其有效。...