产品说明： dCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自 Streptococcus pyogenes 的DNA切割活性缺失突变体Cas9蛋白（D10A，H840A）。蛋白C端添加了NLS信号肽。 Cas9-NLS可以与gRNA稳定结合，并结合到DNA靶点位置。 产品资料： 品名：dCas9-NLS蛋白 蛋白大小：160...

产品名称 spCas9蛋白（带核定位信号） PC1350 产品说明 spCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。spCas9-NLS蛋白高度纯化，可以用于体外切割，也可用于细胞基因编辑。...

在大肠杆菌中表达并通过固定化金属亲和层析(IMAC)纯化的重组His标签蛋白通常与天然大肠杆菌蛋白共洗脱，尤其是当重组蛋白以低水平表达时。大肠杆菌污染物显示出对二价镍或钴离子的高亲和力，这主要是由于成簇的组氨酸残基或生物学相关的金属结合位点的存在。为了提高表达的His标签蛋白的最终纯度，我们改造了大肠杆菌BL21(D...

为了改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统的降低脱靶效应常常需要牺牲其强大的靶上编辑效率。为了同时提高准确性和效率，作者研发了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白。实验显示将两种嵌合蛋白的预组装的核糖核蛋白复合物转染到人或植物细胞中可将靶向基因编辑效率提高600%，而脱靶效应没有显著增加。两...

一、试剂准备1、Cas9过表达慢病毒载体选择。货号名称CR2001pLV-Cas9-PuroCR2002pLV-Cas9-NeoCR2003pLV-Cas9Nick-PuroCR2004pLV-Cas9Nick-Neo我们现提供4种表达Cas9 蛋白的慢病毒载体，您可以根据抗生素要求和基因敲除实验设计进行选择。 1）抗生素选择：Puromycin或G418 用嘌呤霉素筛选比较快，仅需4-7天即筛选...

摘要改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统以降低脱靶效应的努力主要是以牺牲其强大的靶上效率为代价的。为了提高准确性和效率，我们创建了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白，并证明了将两种嵌合蛋白的预组装核糖核蛋白转染到人或植物细胞中导致更高的靶向诱变效率，高达600%，而脱靶效应没有显著增加。...

摘要优化重组蛋白的生产是一个重要的工业和制药问题。宿主细胞对蛋白质的分泌大大简化了下游的纯化过程。然而，对于许多蛋白质来说，这也是限制生产的步骤。目前的解决方案包括对底盘细胞进行广泛的工程改造，以促进蛋白质运输，并限制由过度分泌相关压力引发的蛋白质降解。在这里，我们提出了一个基于调节的策略，在这个策...

虽然RNA和蛋白质的亚细胞动力学是细胞稳态的关键决定因素，但它们的表征仍然具有挑战性。在这里，我们提出了一个整合的框架，通过结合两种方法在亚细胞分辨率下同时询问转录组和蛋白质组的动力学:RNA的定位(LoRNA)和基于密度的同位素标记定位(dLOPIT ),以将RNA和蛋白质映射到细胞器(细胞核、内质网和线粒体)和无膜区室(胞质...

在细菌宿主中包涵体的形成对生物活性蛋白质的大规模回收提出了重大挑战。从包涵体中获得生物活性蛋白的过程是劳动密集型的，并且重组蛋白的产量通常很低。在这里，我们回顾了该领域的发展，旨在通过优化过程的各个步骤，特别是包涵体的溶解和溶解蛋白的重折叠，提高重组蛋白的产量和质量。已经讨论了温和的溶解方法，其基于...

SUMO （small ubiquitin-like modifier）标签蛋白是一种小分子泛素样修饰蛋白，研究发现SUMO可以作为重组蛋白表达的融合标签和分子伴侣，不但可以进一步提高融合蛋白的表达量，且具有抗蛋白酶水解以及促进靶蛋白正确折叠，提高重组蛋白可溶性等功能。SUMO蛋白最早于1996年在酵母中发现其修饰的蛋白，后来发现从酵母到真核细...

CRISPR-Cas系统为基础研究和临床转化应用中正展现出强大的实力和无穷的潜力，其中应用最为广泛的SpCas9系统能与sgRNA形成复合物切割靶位点引入DNA双链断裂（DSBs），之后由非同源重组修复（NHEJ）途径诱导插入缺失突变，或在DNA修复模板的存在下通过同源重组修复（HDR）途径实现精准基因编辑。此外，以CRISPR-Cas9为基础的各...

产品说明：LbCpf1-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Lachnospiraceae bacterium的野生型Cas12a蛋白，蛋白C端添加了NLS信号肽。Cas12a-NLS蛋白高度纯化，可以用于体外切割DNA，也可用于细胞基因编辑。LbCpf1-NLS同时具有DNA和RNA内切酶活性。CRISPR/LbCpf1的初级转录产物pre-crRNA由LbCpf1自身加工，不需要tracrR...

CIRSPR/Cas9是一种在单条guide RNA（gRNA）的指导下利用Cas9核酸酶对靶标DNA进行特异性识别和切割的技术。该过程涉及到Cas9/gRNA与双链DNA（dsDNA）非特异性的结合、在dsDNA上搜索并识别PAM位点、通过与PAM上游的同源匹配形成RNA/DNA异源双链从而实现在dsDNA上靶点区域的特异性结合和切割。由于Cas9可以高效快捷地靶向并切割...

spCas9-NLS蛋白6折优惠啦！！！产品说明spCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。spCas9-NLS蛋白高度纯化，可以用于体外切割，也可用于细胞基因编辑。spCas9-NLS可以在体外与gRNA稳定结合，将Cas9/gRNA复合物通过电转或者转染试剂转染进入细胞即可直接对细...

spCas9-NLS蛋白6折优惠啦！！！产品说明spCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。spCas9-NLS蛋白高度纯化，可以用于体外切割，也可用于细胞基因编辑。spCas9-NLS可以在体外与gRNA稳定结合，将Cas9/gRNA复合物通过电转或者转染试剂转染进入细胞即可直接对细...