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iStop CRISPR基因敲除技术1与以往的CRISPR Cas9基因敲除技术的不同之处在于,不需要DNA双链断裂即可实现基因敲除。iStop技术可以在基因组上实现C>T突变,精确地将四个密码子(CAA、CAG、CGA 和 TGG)转换为终止密码子。由于不需要双链DNA断裂,基因编辑精确温...
酵母表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统,兼有了原核表达的周期短、成本低廉、易操作等优点,易于工业级别放大培养;同时具备了真核细胞对蛋白的空间折叠,糖基化修饰等能力,使得蛋白可溶性大幅度提高,为蛋白的生理活性研究提供了强有力的工具。我们...
原核表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统,也是最经济实惠的蛋白表达系统。本公司已成功构建完整的原核表达技术平台,可以根据客户的需求,提供质粒构建,基因表达,蛋白纯化等一系列服务。 为了满足不同客户的需求,我们推出多种蛋白服务套餐,为...
产品说明: Cas9-NLS-EGFP蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白N端添加了NLS信号肽,蛋白C端加了EGFP荧光标签。Cas9-NLS-EGFP蛋白高度纯化,可以用于体外切割,也可用于细胞基因编辑。该蛋白具有Cas9蛋白的全部活性,...
随着CRIPSR/Cas9技术的应用日益广泛,现在已经有一些sgRNA文库出现,可以对靶基因进行高通量敲除和编辑。这就需要一种能够高效转染和检测各种细胞株的实验平台。现阶段的筛选技术主要在96孔板或者384孔板进行,筛选的通量较低,而且耗费大量昂贵的试剂。化学...
2017年10月6日/ 生物谷 BIOON/---在一项新的研究中,来自瑞典乌普萨拉大学的一个研究小组发现被称为分子剪刀(molecular scissors)的CRISPR-Cas9如何能够在基因组中寻找特定的DNA序列。Cas9已经在生物技术领域有了很多应用,也有望给医学带来革命性的变化。...
美国麻省总医院研发的高保真一种CRISPR-Cas9核酸酶有望提高spCas9核酸酶的特异性,极大降低的Cas9蛋白的脱靶率。该研究发表在Nature杂志上。...
Cas9蛋白体外酶切实验 实验背景: CRISPR/Cas是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可特异剪切外源的病毒及DNA以对抗入侵。 Cas9 /gRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,用于基因敲除和精...
荧光蛋白对照细胞系是用表达EGFP或mCherry的慢病毒转化的稳定表达荧光蛋白的细胞系。可作为RNA干扰或者过表达目的基因的慢病毒转化稳定细胞系的对照细胞系使用。目前有HEK293-GFP细胞系,Hela-GFP细胞系,BHK21-GFP细胞系等。如需其它EGFP对照细胞系可以定制...
一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene(用水配制为6mg/ml,-20℃冻存)。 3.Cas9表达慢病毒( 制备方法见Cas9慢病毒包装实验 )。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染...
核纤层蛋白(Lamin)是中间纤维蛋白家族的重要成员,其多聚体组成的网格状结构核纤层紧贴于核膜内侧。核纤层蛋白具有多种功能,包括抑制基因表达。一直以来,人们难以理解核纤层蛋白突变导致诸如骨骼...
在细菌和人体细胞内部,有各种酶在起作用,其中的许多酶非常奇妙。细胞在内部使用酶来生长、繁殖和制造能量,通常还在细胞壁外部分泌酶。例如,大肠杆菌可以分泌酶来帮助分解食物分子,使自身可以穿过细胞壁进入细胞。稳定细胞系构建介绍下列酶: 蛋白酶和肽...
本报讯(记者孙国根)历经3年多潜心研究,复旦大学上海医学院管坤良、熊跃、雷群英率领的科研团队,终于找到清除肿瘤发生和恶化微环境的新机制,该研究有望为胰腺癌等早期诊断提供可能。近日,国际杂志《癌细胞》刊发了该成果相关论文。 乳酸脱氢酶A在多种肿...
英国科学家最新研究发现,维持胚胎干细胞多功能性的关键蛋白Oct4在其水平下降时会诱发胚胎干细胞进行自我更新,从而使干细胞数量保持在一个均衡状态。相关研究成果发表在《细胞干细胞》杂志上。 作为维持胚胎干细胞多能性的关键蛋白,Oct4控制着胚胎形成早期...
再生医学研究的一个重要课题是:清楚地了解干细胞是如何分化为特殊的器官和组织的.现在,加州大学的Santa Barbara为这一领域的研究增添了新的发现,他的研究小组确定了果蝇中决定干细胞产生不同类型的子细胞的机制.这些结果被发布在今日的Proceedings of the Na...