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实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。 pCas9/gRNA3载体 需要成对发挥作用。我们根据 pTYNE载体 设计构建了 pCas9/gRNA3 阳性对照载体 pCAS9-Pf、pCas9-Pr 。由...
实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...
pCas9/gRNA1 货号:CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除,通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA,实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当,而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...
pCas9/gRNA3载体用于动物细胞基因敲除。该载体表达的Cas9Nickase蛋白是野生Cas9蛋白的D10A突变体。...
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pCas9gRNA7是在前代载体的基础上反复优化得到的Cas9sgRNA共表达载体。由于采用了高特异性Cas9突变体和高效sgRNA,载体的脱靶率显著降低,靶点切割效率和野生型Cas9近似。现在已经应用pCas9gRNA7载体在多种细胞成功实现了基因敲除、敲入以及定点突变等多种基...
货号:PC1380 sgRNA体外转录试剂盒采用T7 RNA聚合酶复合物高效转录sgRNA。试剂盒中的反应体系根据sgRNA特点进行优化,每个反应可在4小时内获得多达50 g的sgRNA。sgRNA纯化后可用Cas9蛋白体外切割及细胞注射等实验。 试剂盒中配备了合成sgRNA转录模板,sgRNA...
Massively parallel Cas13 screens reveal principles for guide RNA design - PMCVI型CRISPR酶最近被鉴定为可编程RNA指导的RNA靶向Cas蛋白,具有核酸酶活性,允许在不改变基因组的情况下敲除靶基因。除了靶RNA敲除,Cas13蛋白还被用于病毒RNA检测,定点RNA编辑,m6A修饰转录物的去甲基化,RNA活体成像,剪接位点选择的调节...
sgRNA体外转录能有多简单? 只需两步就能拿到您想要的sgRNA! 第一步:将靶点引物加入1×PCR mix,放到PCR仪上反应。 第二部:将反应产物加入转录酶mix,孵育4h。 恭喜您已经拿到可用于实验的sgRNA了! 新 sgRNA体外转录试剂盒 更高产量 更稳定的表现 更简单...
仅需体外合成sgRNA+PCR切割模板,无需载体构建和测序就能实现对靶点进行检测。即使零经验的师弟师妹们也能在2-3天内完成从实验材料准备到得到靶点切割结果。 spCas9体外酶切试剂盒:快速进行靶点筛选 酶切仅需30min 高效检测靶点 快速展开实验 显著提高基因...
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北京英茂盛业新研发的Cas9体外酶切试剂盒完成体外酶切实验仅需30分钟,为您快速筛选有效靶点提供了便利的工具。...
实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...