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本细胞株产品是用两个慢病毒感染后,用抗生素筛选得到的稳定多克隆细胞株。用到的两个慢病毒载体分别为:pLV-dCas9-VP64-Bsd:表达无DNA酶活性的dCas9蛋白与转录激活因子VP64的融合蛋白。该融合蛋白与sgRNA结合后,将定位于细胞基因组DNA的特定位置,并产生转录激活作用。pLV-dCas9-VP64-Bsd慢病毒载体表达Bsd抗性基因,转染细胞后,可以用Blasticidin筛选阳性细胞株。pLV-MPH-Hygro:表达MS2/P65/HSF1融合蛋白。与sgRNA结合并协同产生转录激活作用。pLV-MPH-Hygro慢病毒载体表达Hygromycin抗性基因。CRISPR-SAM采用无DNA切割活性的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白,加上能与MS2蛋白结合的sgRNA2.0,特异性识别并结合含sgRNA靶点的启动子。MS2蛋白连接p65和HSF1转录激活蛋白(MPH融合蛋白)。通过多种转录激活蛋白的协同作用,能更好的摸底细胞内转录激活。Hela-dCas9-VP64-MPH细胞稳定表达dCas9-VP64融合蛋白和MPH融合蛋白。只需要转入配套的sgRNA表达质粒或者人工合成的sgRNA就能实现基因特异性转录激活。...
CRISPR dCas9 SAM技术 CRISPR SAM(synergistic activation mediator)采用切割活性缺失的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白,加上能与RNA结合蛋白MS2的sgRNA2.0,特异性识别并结合目标基因的启动子。MS2蛋白上连接p65和HSF1转录激活蛋白。通过多种转录激活蛋白...
产品说明dCas9-NLS蛋白 PC1351产品说明dCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的DNA切割活性缺失突变体Cas9蛋白(D10A,H840A)。蛋白C端添加了NLS信号肽。Cas9-NLS可以与gRNA稳定结合,并结合到DNA靶点位置。产品资料品名:dCas9-NLS蛋白蛋白大小:160kd货号:PC1351表达宿主:E.coli纯...
无标题文档 Cat. No. CR1031 dCas9-VP64慢病毒表达载体 载体特性: 类型:dCas9-VP64慢病毒表达载体 基因启动子:CMV IE promoter 表达基因:dCas9-SV40NLS-VP64 真核细胞筛选抗性:blasticidin 原核抗性:Ampicillin pLV-dCas9-VP64-Bsd载体是基于HIV1的慢...
产品说明: dCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自 Streptococcus pyogenes 的DNA切割活性缺失突变体Cas9蛋白(D10A,H840A)。蛋白C端添加了NLS信号肽。 Cas9-NLS可以与gRNA稳定结合,并结合到DNA靶点位置。 产品资料: 品名:dCas9-NLS蛋白 蛋白大小:160...
在代谢工程领域,以高通量和可扩展的方式解析基因型和表型的关系仍然不成熟。虽然RNA指导的核酸酶Cas9已被赋予新的用途,用于可编辑的转录调控,但是它的应用被局限于双重调控开关,因此错过了潜在的最佳中间水平的基因表达。此项研究建立了一个快速的方法用...