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pLV-dCas9-VP64-BSd慢病毒表达载体(CR1031 )

载体特性
类型：dCas9-VP64慢病毒表达载体
基因启动子：CMV IE promoter
表达基因：dCas9-SV40NLS-VP64
真核细胞筛选抗性：blasticidin
原核抗性：Ampicillin

      pLV-dCas9-VP64-Bsd载体是基于HIV1的慢病毒基因过载体。载体表达dCas9-SV40NLS-VP64，用于CRISPR转录激活实验。利用本载体包装的慢病毒将表达blasticidin抗性基因，可以方便地使用blasticidin筛选出稳定细胞系。 pLV-dCas9-VP64-Bsd载体包含了生产慢病毒所必须的病毒原件以及提高病毒滴度及基因表达效率的原件。载体结构紧凑，病毒包装效率高。

用法说明
     pLV-dCas9-VP64-Bsd载体与包装载体共转染HEK293T细胞后（包装体系货号KLV3501和KLV3502），产生高滴度复制缺陷的慢病毒颗粒，可以直接用于感染细胞或者纯化浓缩后感染细胞。

测序引物：
正向引物CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
正向引物Bsd-R：CTCCTGAGACAGTGGCT

原核培养特性
    pLV-dCas9-VP64-Bsd载体为高拷贝质粒，带有氨苄抗性基因，可以在含有100ug/ml氨苄抗生素的LB培养基中增殖。宿主菌可以采用DH5a，JM109，TOP10等常见大肠杆菌菌种。

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