大肠杆菌Nissle 1917基因编辑服务

大肠杆菌Nissle 1917（EcN）简介

大肠杆菌Nissle 1917（Escherichia coli Nissle 1917，简称EcN）是一株具有悠久历史和良好安全性记录的益生菌菌株。该菌株属于O6:K5:H1血清型，由Alfred Nissle博士在第一次世界大战期间从一名对严重腹泻具有独特抵抗力的德国士兵体内分离得到。

英茂盛业掌握成熟的Nissle 1917基因编辑技术，可提供全方位的EcN基因改造服务，包括Nissle 1917基因敲除、Nissle 1917基因敲入、Nissle 1917定点突变等。我们基于Red同源重组、CRISPR/Cas9等多种技术平台，为您的益生菌工程研究提供高效、可靠的基因编辑解决方案。

服务内容

我们提供完整的大肠杆菌Nissle 1917基因编辑服务，涵盖以下核心服务类型：

其他定制服务

• 多基因编辑：同时敲除/敲入多个基因，构建复杂工程菌株

• 内源质粒消除：消除EcN内源性质粒pMUT1和pMUT2，优化表达系统

• 启动子工程：替换或优化内源基因启动子，实现基因表达精准调控

• 报告基因整合：整合GFP、Luciferase等报告基因，用于体内示踪研究

• 代谢通路重构：系统性改造代谢通路，构建高产工程菌株

技术平台

英茂盛业拥有多种成熟的Nissle 1917基因编辑技术平台，可根据您的具体需求选择最适合的技术方案：

1. Red同源重组技术

Red同源重组系统是来自lambda噬菌体的重组系统，是Nissle 1917基因编辑的经典技术。该系统在pKD46载体表达Gam、Exo、Beta三个蛋白，实现将外源DNA同源重组到大肠杆菌基因组。

我们在Red重组系统的基础上加入Cre-loxP系统对插入的筛选抗性基因进行清除，基本实现无痕编辑。

• 技术特点：技术成熟稳定，敲入敲除效率高，操作简单

• 适用范围：基因敲除、基因敲入、大片段插入

• 服务周期：4-6周

• 服务价格：询价

2. CRISPR/Cas9基因编辑技术

CRISPR/Cas9定点切割基因组DNA，然后由Red重组酶进行修复。未能修复成功的Nissle 1917因基因组DNA断裂死亡，修复成功的个体即编辑成功的个体得以存活。CRISPR/Cas9系统可以真正做到无痕基因编辑。

与Red同源重组系统相比，CRISPR/Cas9系统由于其独特的无标签筛选阳性克隆的机制，在进行需要很高精确度的定点突变中有较大优势。

• 技术特点：真正无痕编辑，精确度高，筛选效率高

• 适用范围：基因敲除、定点突变、精准基因敲入

• 服务周期：5-7周

• 服务价格：询价

3. 无痕基因组整合技术

针对Nissle 1917转化效率较低的特点，我们开发了基于细菌接合的无痕基因组整合技术。该技术结合细菌接合与markerless基因组工程，可高效地在EcN染色体不同位点插入多个目的基因，最终改造后的菌株不含抗生素抗性基因、载体序列或疤痕。

• 技术特点：完全无痕，多基因整合效率高，遗传稳定性好

• 适用范围：多基因敲入、代谢通路构建、临床级菌株构建

• 服务周期：6-8周

• 服务价格：询价

技术方案对比

三种Nissle 1917基因编辑技术方案对比，帮助您选择最适合的技术路线：

应用领域

工程化的大肠杆菌Nissle 1917在生物医药、合成生物学等领域具有广泛应用：

我们的优势

服务流程

交付内容

• 编辑成功的Nissle 1917菌株：2-3管甘油菌保存

• 实验报告：详细的实验操作流程和结果分析

• 验证数据：PCR鉴定电泳图、测序验证峰图和序列比对结果

• 菌株信息：完整的基因型说明和培养建议

常见问题