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我们根据pTYNE载体的序列设计了pCas9/gRNA1对照阳性质粒pCas9-P,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCas9-P表达的Cas9蛋白和gRNA组合现对pTYNE载体切割,经细胞修复后,突变的pTYNE将表达出读码框正确的EGFP蛋白,发出明亮的绿色荧光。...
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poly(rA)双螺旋结构 1953年,弗朗西斯克里克和詹姆斯沃森发现了脱氧核糖核酸(DNA)的双螺旋结构。自此,科学界掀起了一场对这个生命体最基本构建模块进行图绘、研究和测序的革命。 DNA对代代相传的遗传物质进行编码。要将DNA中编码的信息制成生命所必需的...
siRNA合成的方法主要包括: 1、化学合成 2、体外转录 3、长片断dsRNA经RNaseIII类降解(如Dicer、E.coli、RNaseIII) 4、siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAs 5、PCR制备的siRNA表达框在细胞中表达 前三种方法主要都是体外制备siRNAs,并且需要专门...
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够以序列...
若诊断结果显示某人患有一种大脑肿瘤多形性胶质母细胞瘤(GBM),这对他往往是具有打击性的,因为可用于治疗这种肿瘤的方法很少,并且该癌症具有较差的预后.那些可以消除其他恶性肿瘤的疗法,例如化疗或外科手术,对于GBM患者来说只是可以延长一点有限的生命罢了....
英茂盛业慢病毒RNA干扰载体构建方法.可以构建我公司慢病毒RNA干扰载体pLVshRNA-EGFP、pLVshRNA-Puro和双标RNA干扰载体pLVshRNA-EGFP(2A)Puro。...
RNA干扰靶序列设计的方法最初由 Elbashir et.al 2001 发表。之后由于发现了RISC与siRNA结合的偏好,设计干扰效果优秀的siRNA的成功率大大增加。我们主要采用 Pei and Tuschl ( N2[CG]N8[AUT]N8[AUT]N2 )发表的设计原则进行设计。对初步筛选出的所有符合条...
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小 RNA 的鉴定、检测和使用在过去的几年中得到了迅猛的发展。我们在小鼠的睾丸中研究了这两个内在相关的领域。首先,通过基因芯片和小 RNA 文库筛选系统,一组组织特异性和时间短期表达变化的调节性小 RNA 被鉴定出来。其次,小的双链小干扰 RNA ,是一种下...
pRI系列RNA干扰载体2011春季特惠活动...