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我们根据pTYNE载体的序列设计了pCas9/gRNA1对照阳性质粒pCas9-P，该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCas9-P表达的Cas9蛋白和gRNA组合现对pTYNE载体切割，经细胞修复后，突变的pTYNE将表达出读码框正确的EGFP蛋白，发出明亮的绿色荧光。...

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通过采用Cas9 D10A突变蛋白，对DNA进行单链而不是双链切割，解决CRISPR/gRNA系统中的脱靶问题。...

1、反应后无扩增曲线出现 确认程序中是否设置了信号采集步骤：两部法扩增程序一般将信号采集设置在退火延伸阶段；三步法扩增程序应当将信号采集设置在72℃延伸阶段。 扩增效率问题：电泳检测realtimePCR反应产物，观察是否有正确大小的目的条带出现。如果没...

实时荧光定量PCR（RealtimePCR，QPCR）技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程， 最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR（real-time quantitative PCR）技术实现了PCR从定性到 定量的飞跃，它以...

若诊断结果显示某人患有一种大脑肿瘤多形性胶质母细胞瘤(GBM),这对他往往是具有打击性的,因为可用于治疗这种肿瘤的方法很少,并且该癌症具有较差的预后.那些可以消除其他恶性肿瘤的疗法,例如化疗或外科手术,对于GBM患者来说只是可以延长一点有限的生命罢了....

细胞生命活动依赖于胞内运输系统。细胞内的运输系统将大量需要运输的物质分拣、包装到膜状的囊泡结构中，利用动力蛋白（又称为分子马达molecular motor）水解ATP产生的能量驱动囊泡在微管或微丝细胞骨架充当的轨道上移动，高效精确地将各种货物定向运输到相...

来自加州大学旧金山分校的研究人员发现了一种更精确关闭基因的方法，这一成果将加速研究发现和生物技术进步，最终有可能应用于重新编程细胞再生器官和组织。该策略借用了细菌的分子工具箱，利用了一种微生物用以抵抗病毒的蛋白质。研究人员在《细胞》（Cell...

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