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实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。 pCas9/gRNA3载体 需要成对发挥作用。我们根据 pTYNE载体 设计构建了 pCas9/gRNA3 阳性对照载体 pCAS9-Pf、pCas9-Pr 。由...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据pTYNE载体上错码的EGFP的上游区域设计并构建了Cas9蛋白基因敲除实验的阳性对照gRNA表达载体pGR-Hygro-P。 pTYNE...
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Massively parallel Cas13 screens reveal principles for guide RNA design - PMCVI型CRISPR酶最近被鉴定为可编程RNA指导的RNA靶向Cas蛋白,具有核酸酶活性,允许在不改变基因组的情况下敲除靶基因。除了靶RNA敲除,Cas13蛋白还被用于病毒RNA检测,定点RNA编辑,m6A修饰转录物的去甲基化,RNA活体成像,剪接位点选择的调节...
突变率和突变对适应度的影响对进化至关重要。由于突变率修饰因子和突变对适合度的影响之间的联系,突变率正在选择中。较高突变率和更有益突变之间的联系选择较高突变率,而较高突变率和更有害突变之间的联系选择较低突变率。突变率选择的净方向取决于适应度景观,大量的工作已经阐明了突变的适应度景观。然而,测试在单一环...
包涵体来源的蛋白质的重折叠是非常有前途的,因为它可以提供高纯度目标蛋白质的可靠来源。然而,基于包涵体的蛋白质生产经常受到缺乏检测正确重折叠蛋白质的技术的限制。因此,重折叠条件的选择大部分是使用试错法实现的,因此是一个耗时的过程。在这项研究中,我们使用了差示扫描荧光导向重折叠方法的最新进展作为分析方法...
RISPR/Cas9 技术极大方便了基因编辑的操作。利用 CRISPR/Cas9 进行基因编辑,其基本原理为:第一步先对需要编辑的位点进行切割,造成 DNA 断裂;第二步用细胞的 DNA 修复机制对 DNA 断裂点进行修复。从而产生需要的突变结果。 目前主要有两种方式进行基因敲...
Cas9蛋白体外酶切实验 实验背景: CRISPR/Cas是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可特异剪切外源的病毒及DNA以对抗入侵。 Cas9 /gRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,用于基因敲除和精...
MTT检测被广泛的应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。北京英茂盛业生物科技有限公司以顶尖的技术为广大科研工作者提供MTT实验服务...
我们根据pTYNE载体的序列设计了pCas9/gRNA1对照阳性质粒pCas9-P,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCas9-P表达的Cas9蛋白和gRNA组合现对pTYNE载体切割,经细胞修复后,突变的pTYNE将表达出读码框正确的EGFP蛋白,发出明亮的绿色荧光。...
【据日本《产经新闻》8月2报道,日本京都大学iPS细胞研究所江藤浩之教授(干细胞生物学)带领的研究团队8月1日发表声明称,使用源于血液病患者体内的人工诱导多功能干细胞(iPS细胞)进行实验时,发现了红血球合成的部分过程。该结果刊登在了美国科学杂志《临床...
原文标题:印度用老鼠干细胞培育出内耳 中国科技网讯 据物理学家组织网7月10日报道,印度科学家在今天出版的《自然》杂志网络版上撰文表示,他们已经成功地将实验鼠的胚胎干细胞转化成了内耳的关键结构。最新发现有望让科学家们更好地理解内耳的发育过程,并...
5月25-27日,细胞应激生物学国家重点实验室第一届学术委员会第二次会议在翔安校区顺利召开。学术委员会委员们和实验室成员参加了本次会议。会议由学术委员会主任清华大学王志新院士主持。这次会议的主要议题是检查国重室建设期的工作,审阅国重室提交的验收...