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Nature Methods杂志是Nature出版社旗下的著名期刊之一,也是方法学领域的权威刊物,主要刊载具有创新性的技术进展,在去年之前,大陆学者在此刊物上发表的技术文章仅有3篇。近期来自北京大学生科院,加州大学洛杉矶分校的研究人员在这一著名期刊上发表了题为...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...
实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。 pCas9/gRNA3载体 需要成对发挥作用。我们根据 pTYNE载体 设计构建了 pCas9/gRNA3 阳性对照载体 pCAS9-Pf、pCas9-Pr 。由...
实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...
Cat. No.CR1011 pTYNE载体中含有起始密码子移位突变,在未发生DNA剪切和突变时不能有效表达EGFP蛋白,不出现荧光。当 pCas9/gRNA1载体 或 pCas9/gRNA3载体 表达出的Cas9/gRNA复合物实现对pTYNE质粒的切割后,DNA断裂引发的NHEJ作用即可实现对EGFP蛋白的修复...
pCas9/gRNA1 货号:CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除,通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA,实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当,而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...
pCas9/gRNA3载体用于动物细胞基因敲除。该载体表达的Cas9Nickase蛋白是野生Cas9蛋白的D10A突变体。...
CRISPR/Cas9基因编辑技术可以在各种生物中实现基因组编辑。我们采用大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒(CR3010),实现了敲除BL21菌种中的lacZ(β-半乳糖苷酶)基因,敲除效率高达90%。...
货号:CR3010-S/CR3010-D 本试剂盒采用CRISPR/Cas9系统对大肠杆菌基因组进行编辑。可以实现对基因的敲除、敲入、点突变等。也可以同时对基因组的多个位点进行编辑。试剂盒中配备了实验过程所需要的全部载体、酶及反应试剂,您仅需合成数条引物即可完成整个实...
菌种名称: BL21 ( DE3 ) lacZ 敲除菌种 构建方法: CRISPR/Cas9 验证方法:蓝白斑检测,基因组 PCR 测序。 BL21 ( DE3 ) lacZ 敲除菌种是采用 CRISPR/Cas9 技术构建的菌种。在原 BL21 ( DE3 )菌种的 lacZ 基因中敲入终止密码子,导致 lacZ 基因失活。...
iStop CRISPR基因敲除技术(1)与以往的CRISPR Cas9基因敲除技术的不同之处在于,不需要DNA双链断裂即可实现基因敲除。iStop技术可以在基因组上实现CT突变,精确地将四个密码子(CAA、CAG、CGA 和 TGG)转换为终止密码子。由于不需要双链DNA断裂,基因编辑精...
名称: BL21(DE3) -argA 敲除菌株 货号:EC1017 规格:200ul 甘油菌,2 支 保存:-80℃ 抗性:无 培养基:LB 培养温度:37℃ 简介: 利用 Red 同源重组系统和 Cre-loxp 系统, 将大肠杆菌基因组 BL21(DE3)的 argA 基因进行无痕敲除,即得 BL21(DE3) -argA 敲...
名称: BL21(DE3) -astA 敲除菌株 货号:EC1016 规格:200ul 甘油菌,2 支 保存:-80℃ 抗性:无 培养基:LB 培养温度:37℃ 简介: 利用 Red 同源重组系统和 Cre-loxp 系统, 将大肠杆菌基因组 BL21(DE3)的 astA 基因进行无痕敲除,即得 BL21(DE3) -astA 敲...
名称: BL21(DE3) -eptA 敲除菌株 货号:EC1015 规格:200ul 甘油菌,2 支 保存:-80℃ 抗性:无 培养基:LB 培养温度:37℃ 简介: 利用 Red 同源重组系统和 Cre-loxp 系统, 将大肠杆菌基因组 BL21(DE3)的 eptA 基因进行无痕敲除,即得 BL21(DE3) -eptA 敲...
名称: BL21(DE3) -cysJ 敲除菌株 货号:EC1014 规格:200ul 甘油菌,2 支 保存:-80℃ 抗性:无 培养基:LB 培养温度:37℃ 简介: 利用 Red 同源重组系统和 FLP-FRT 系统, 将大肠杆菌基因组 BL21(DE3)的cysJ 基因进行无痕敲除,即得 BL21(DE3) -cysJ 敲除...