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基因过表达细胞系构建服务

基因过表达细胞株构建服务包括目的基因过表达慢病毒载体构建、病毒包装、细胞转染和筛选。您只需提供目的基因的cDNA质粒和需要构建的细胞系，我们将按照您的要求完成目的基因过表达细胞株的构建和检测，提供给您高质量的基因过表达稳定细胞株。

服务特点

1、多种不同启动子和标签的慢病毒表达载体可供选择，具体载体信息请见慢病毒载体。

2、采用慢病毒系统构建，基因整合稳定。

3、根据您的需要可以提供经济实惠的多克隆细胞系或者高品质的单克隆细胞系。具体细胞系选择请见相关介绍。

您需提供的资料

1、待构建野生细胞株及细胞株培养资料。

2、含有目的基因cDNA的质粒。

3、目的基因功能相关参考文献及其他您认为有参考价值的资料。

我们提交的内容

1、实验报告内容：

    A 慢病毒载体构建报告及测序结果。

    B 细胞筛选实验报告。

    C 目的基因表达检测结果。

2、产品内容：

    A 已构建慢病毒载体；

    B 多克隆细胞系构建服务提供目的基因过表达细胞株及EGFP表达对照细胞株各一株，单克隆细胞株构建服务提供目的基因过表达单克隆细胞株2-3株及EGFP过表达对照细胞株一株。

 

基因过表达细胞株构建案例

服务内容：将目的基因构建到慢病毒载体pLV-puro上，得到目的基因过表达慢病毒载体pLV-puro-ZJY。分别用慢病毒载体pLV-puro-ZJY和对应空载体pLV-puro包装成慢病毒后感染293V细胞，通过puromycin筛选目的基因过表达稳定细胞株。

 

一、表达载体构建

PCR扩增目的基因全长cDNA，使用无缝克隆的方法构建到慢病毒载体pLV-puro上。

慢病毒载体图谱:

二、细胞筛选及克隆检测

构建的目的基因过表达载体pLV-puro-ZJY和对应空载体pLV-puro包装成慢病毒后感染293V细胞。用puromycin筛选稳定细胞株，得到过表达多克隆细胞株后用有限稀释法分离单克隆。分别提取多克隆细胞株和单克隆细胞株总RNA进行qPCR检测。检测结果如下：

基因相对表达量

常见问题和资料

• 稳定细胞株构建服务常见问题

• 单克隆细胞系和多克隆细胞系特点及选择指南