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Precise RNA targeting with CRISPR–Cas13d | Nature BiotechnologyCas13的的侧枝RNA降解的可能性引起了对转录组扰动,影响CRISPR–cas 13的治疗应用。研究表明,侧枝活性只发生在高RfxCas13d表达的情况下。在转录组规模和组合池筛选中使用低拷贝RfxCas13d,我们实现了高靶向敲除,而没有广泛的侧枝活动。此外,对高保真Ca...
使用时pEGFP/puro与pCas9/gRNA1载体或者pCas9/gRNA3载体共转染,用荧光标签或者嘌呤霉素对转染后的细胞进行初步筛选,可以显著提高基因敲除成功细胞的阳性率,减少后续细胞克隆检测数量。这个步骤对于转染效率较低的细胞尤其有效。...
Quantification of long non-coding RNAs using qRT-PCR: comparison of different cDNA synthesis methods and RNA stability - PMC长非编码RNA(lncRNA)是一类调控RNA分子,长度超过200个核苷酸,可用作新的潜在生物标志物,但其检测方法如qRT-PCR仍未得到验证,RNA降解对lnc RNA定量的影响尚不清楚。在这项研究中,测试了...
Overexpression of lncRNAs with endogenous lengths and functions using a lncRNA delivery system based on transposon | Journal of Nanobiotechnology | Full Text背景长非编码RNA在许多生理和病理过程中发挥重要作用,这表明长非编码RNA可以作为基因治疗的潜在靶点。稳定表达是研究lncRNAs的基础技术。慢病毒是用于稳...
摘要优化重组蛋白的生产是一个重要的工业和制药问题。宿主细胞对蛋白质的分泌大大简化了下游的纯化过程。然而,对于许多蛋白质来说,这也是限制生产的步骤。目前的解决方案包括对底盘细胞进行广泛的工程改造,以促进蛋白质运输,并限制由过度分泌相关压力引发的蛋白质降解。在这里,我们提出了一个基于调节的策略,在这个策...
资料来源:VentureBeat 3D打印技术既神奇又酷,连名片都可以印制成3D立体造型,印出3D手枪也不是难题,现在3D打印技术甚至可以拯救你的生命! 英国科学家成功使用一种装载控制阀的细胞打印机(valve-basedcellprinter),其中填充生物墨水(bio-ink)以制造可存活...