Tailoring the evolution of BL21(DE3) uncovers a key role for RNA stability in gene expression toxicity | Communications BiologyGene expression toxicity is an important biological phenomenon and a major bottleneck in biotechnology.Escherichia coliBL21(DE3) is the most popular choice for r...

Nature Methods杂志是Nature出版社旗下的著名期刊之一，也是方法学领域的权威刊物，主要刊载具有创新性的技术进展，在去年之前，大陆学者在此刊物上发表的技术文章仅有3篇。近期来自北京大学生科院，加州大学洛杉矶分校的研究人员在这一著名期刊上发表了题为...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

CRISPR/Cas9基因编辑技术可以在各种生物中实现基因组编辑。我们采用大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒（CR3010），实现了敲除BL21菌种中的lacZ（β-半乳糖苷酶）基因，敲除效率高达90%。...

RNA干扰(RNAi)是治疗和研究应用中序列特异性基因敲除的有力工具。然而，需要对RNAi进行时空控制，以减少非特异性靶向、潜在毒性，并允许靶向必需基因。在本文中，我们描述了一类从头设计的RNA开关，其能够在哺乳动物细胞中对RNAi进行序列特异性调节。使用顺式抑制RNA元件，我们设计了RNA装置，该装置仅在与同源触发RNA结合时...

在大肠杆菌中表达并通过固定化金属亲和层析(IMAC)纯化的重组His标签蛋白通常与天然大肠杆菌蛋白共洗脱，尤其是当重组蛋白以低水平表达时。大肠杆菌污染物显示出对二价镍或钴离子的高亲和力，这主要是由于成簇的组氨酸残基或生物学相关的金属结合位点的存在。为了提高表达的His标签蛋白的最终纯度，我们改造了大肠杆菌BL21(D...

在细菌宿主中包涵体的形成对生物活性蛋白质的大规模回收提出了重大挑战。从包涵体中获得生物活性蛋白的过程是劳动密集型的，并且重组蛋白的产量通常很低。在这里，我们回顾了该领域的发展，旨在通过优化过程的各个步骤，特别是包涵体的溶解和溶解蛋白的重折叠，提高重组蛋白的产量和质量。已经讨论了温和的溶解方法，其基于...

本文分享excel多个工作簿查询数据提取汇总方法，使用到Power Query插件来完成Excel不同工作簿数据汇总.小王所在的公司在全国各地都有分部，每到年底小王都很头疼。各个地区的销售数据需要汇总，尽管工作簿模板一致，但是全国那么多城市，工作簿也要逐一打开复制粘贴数据。工作簿容量有的大有的小，一个个打开要花费大量的时...

基因敲除实验经常用于基础和应用生物学研究。文中作者开发了一种基于整合辅助质粒的基因敲除系统，用于更高效、更快速地进行大肠杆菌工程学研究。整合辅助质粒 pCW611 含有两种重组酶，由两个独立的诱导系统反向表达。一个是由阿拉伯糖诱导系统控制的 Red 重组酶，利用线性基因敲除 DNA 片段诱导重组事件；另一个是由异丙基...

英茂盛业在客户的支持下已经走过7年。在7年中我们从一家专门从事基因合成，分子克隆的公司逐渐成长为以细胞基因编辑技术为核心，有着成熟的细胞稳转株构建系统、细胞基因敲除体系的细胞技术服务公司。我们成长的每一步都离不开每个公司成员的全力以赴，更离...

阿维菌素是一个有30多年应用历史的老品种了，1991年美国默克公司在我国获得临时登记，商品名称害极灭，这是阿维菌素首次在我国登记，距今已经26年了。笔者将阿维菌素划分了3个发展阶段：2007年之前、2007?2017年、2017年以后。这3个阶段分别代表着阿维菌素发...

无标题文档 Yao JT等人在2017年发表的研究中表示，对非小细胞肺癌（NSCLC）中的 circRNA _100876的qPCR检测结果显示，circRNA_100876可以作为一种肿瘤标志物，有助于判断非小细胞肺癌患者的预后。 目前的研究表明 环状RNA （ Circular RNAs ）是一类内源的、...

CRISPR/Cas9基因编辑技术可以在各种生物中实现基因组编辑。我们采用大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒（CR3010），实现了敲除BL21菌种中的lacZ（β-半乳糖苷酶）基因，敲除效率高达90%。...

1、反应后无扩增曲线出现 确认程序中是否设置了信号采集步骤：两部法扩增程序一般将信号采集设置在退火延伸阶段；三步法扩增程序应当将信号采集设置在72℃延伸阶段。 扩增效率问题：电泳检测realtimePCR反应产物，观察是否有正确大小的目的条带出现。如果没...

干细胞治疗中风获进展专家提醒利好之下仍需警惕 京华时报讯 （记者阳荻雯）据新华社报道，英国研究人员27日宣布，他们开展的首个干细胞治疗中风试验取得初步成果，部分接受治疗的患者病情有所缓解，目前正准备申请二期临床试验。 据报道，研究人员在试验中将...