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1、反应后无扩增曲线出现 确认程序中是否设置了信号采集步骤:两部法扩增程序一般将信号采集设置在退火延伸阶段;三步法扩增程序应当将信号采集设置在72℃延伸阶段。 扩增效率问题:电泳检测realtimePCR反应产物,观察是否有正确大小的目的条带出现。如果没...
实时荧光定量PCR(RealtimePCR,QPCR)技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程, 最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术实现了PCR从定性到 定量的飞跃,它以...
小 RNA 的鉴定、检测和使用在过去的几年中得到了迅猛的发展。我们在小鼠的睾丸中研究了这两个内在相关的领域。首先,通过基因芯片和小 RNA 文库筛选系统,一组组织特异性和时间短期表达变化的调节性小 RNA 被鉴定出来。其次,小的双链小干扰 RNA ,是一种下...