2017年3月11日/ 生物谷 BIOON/---在一项新的研究中，来自美国伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校的微生物学教授Bill Metcalf和博士后研究员Dipti Nayak首次记录了在古生菌（Archaea，也译作古 细菌 ，或古菌）中使用CRISPR-Cas9介导的基因组编辑。他们的突破性工作...

RISPR/Cas9 技术极大方便了基因编辑的操作。利用 CRISPR/Cas9 进行基因编辑，其基本原理为：第一步先对需要编辑的位点进行切割，造成 DNA 断裂；第二步用细胞的 DNA 修复机制对 DNA 断裂点进行修复。从而产生需要的突变结果。 目前主要有两种方式进行基因敲...

英茂盛业AAVS1 CRISPR-Cas9 体系能特异剪切人类第19号染色体上的 AAVS1 位点，生成DNA双链断裂（DSB），触发DNA的自然修复机制，诱导位点与 AAVS1供体 DNA 克隆之间发生同源重组（HR），将供体克隆上的 DNA 片段整合到基因组上的 safe harbor 位点。...

发表在《自然-生物技术》上的题为“利用NgAgo进行DNA引导的基因组编辑”的论文于北京时间8月3日撤稿...

CRISPR SAM（synergistic activation mediator）采用切割活性缺失的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白，加上能与RNA结合蛋白MS2的sgRNA2.0，特异性识别并结合目标基因的启动子。MS2蛋白上连接p65和HSF1转录激活蛋白。通过多种转录激活蛋白的协同作用，能更好的模...

北京英茂盛业研发的E. coli. Cas9基因编辑试剂盒基于CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以高效实现大肠杆菌的基因敲除、敲入、突变以及多种突变体构建等各种基因编辑方式。并且基因编辑后不留痕迹和抗性基因，菌种可以很方便地进行下一轮基因编辑。...

CRISPR/Cas9基因编辑技术可以在各种生物中实现基因组编辑。我们采用大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒（CR3010），实现了敲除BL21菌种中的lacZ（β-半乳糖苷酶）基因，敲除效率高达90%。...

即日起凡购买 CRISPR/Cas9试剂盒 （货号CR001）或者 CRISPR/Cas9 Nick试剂盒 （货号CR002），免费赠送配套 细胞筛选质粒pEGFP/puro 一支。 试剂盒介绍 一、 CRISPR/Cas9试剂盒 货号CR001 CRISPR/Cas9试剂盒的功能包括：构建针对靶基因的基因敲除载体，对基因...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

我们根据pTYNE载体的序列设计了pCas9/gRNA1对照阳性质粒pCas9-P，该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCas9-P表达的Cas9蛋白和gRNA组合现对pTYNE载体切割，经细胞修复后，突变的pTYNE将表达出读码框正确的EGFP蛋白，发出明亮的绿色荧光。...

通过采用Cas9 D10A突变蛋白，对DNA进行单链而不是双链切割，解决CRISPR/gRNA系统中的脱靶问题。...

pLV-Dual载体是基于HIV1的慢病毒基因过表达载体，可以用于慢病毒表达基因或直接转染细胞表达基因。载体中含有CMV启动子和SV40启动子，可以实现在同一个载体中表达2个基因。PGK启动子启动Puromycin抗性基因表达。利用本载体包装的慢病毒将表达Puromycin抗性基...

据物理学家组织网近日报道，美国国立卫生研究院的研究人员 通过降低单个基因的表达 让一群小鼠的平均寿命延长了20%。如果换做成人类的话，相当于将寿命延长了16年从79岁延长到了95岁。这项研究发表在近日出版的《细胞报告》杂志上。 该研究小组针对的是一个...

TALEN 敲除小鼠 P53 基因及 talen 质粒活性验证 验证原理： 将 talen 靶点附近序列从基因组上扩增，克隆到验证质粒中 EGFP 基因上游，与 EGFP 基因融合。 Talen 质粒对与验证质粒共转染 293V 细胞，表达的 talen 蛋白对验证质粒上靶点序列进行切割，造成 EGF...

一、生化方法 1、磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 （1）转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1105至4105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%～7% CO2的37℃温箱孵育20～24 h。转染前1 h换液。 （2）按照下属方法...