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实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子,由于不能有效地启动EGFP表达, pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...
实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...
pCas9/gRNA1 货号:CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除,通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA,实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当,而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...
我们根据pTYNE载体的序列设计了pCas9/gRNA1对照阳性质粒pCas9-P,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCas9-P表达的Cas9蛋白和gRNA组合现对pTYNE载体切割,经细胞修复后,突变的pTYNE将表达出读码框正确的EGFP蛋白,发出明亮的绿色荧光。...
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