实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据pTYNE载体上错码的EGFP的上游区域设计并构建了Cas9蛋白基因敲除实验的阳性对照gRNA表达载体pGR-Hygro-P。 pTYNE...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染病毒时细胞密度在80%左右。 2、取出...

style type=text/css !-- .STYLE1 { color: #FF0000; font-weight: bold; } .STYLE2 {color: #FF0000} -- /style pstrong货号：/strongstrongC1203/strongbr strong培养基：/strongDMEM高糖培养基+10%胎牛血清 br strong消化液：/strong0.25%胰蛋白酶，0.53m...

货号：C1204 培养基：DMEM 高糖培养基+10%胎牛血清 消化液：0.25%胰蛋白酶，0.53mMEDTA 冻存液：50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO 培养条件：37℃，5%CO 2 细胞简介： 293T‐Cas9Nick 细胞是用 HEK293T 细胞构建的稳定表达 Cas9 蛋白的细胞株。在转入 gRNA 表...

货号： C1208 培养基： DMEM高糖培养基+10%胎牛血清 消化液： 0.25%胰蛋白酶，0.53mM EDTA 冻存液： 50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO 培养条件： 37℃，5% CO2 细胞简介： 293T-TYNE细胞的基因组稳定整合了含有起始密码子移位突EGFP基因。在未发生DNA 剪切和...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...