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作者开发了一种新的、简单的、高通量的方法来分离大肠杆菌K-12的全基因组转座子插入突变体。该方法的基本思想是通过首先插入一个小型转座子,随机破坏在Kohara文库上克隆的DNA片段上的基因,然后通过同源重组将破坏的基因从载体转移到大肠杆菌染色体上。利用这种方法,我们构建了一组8402 Kmr顺式二倍体突变体,染色体上带有...
随着CRIPSR/Cas9技术的应用日益广泛,现在已经有一些sgRNA文库出现,可以对靶基因进行高通量敲除和编辑。这就需要一种能够高效转染和检测各种细胞株的实验平台。现阶段的筛选技术主要在96孔板或者384孔板进行,筛选的通量较低,而且耗费大量昂贵的试剂。化学...