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293V-mCherry细胞(CG0013)


培养基:DMEM高糖培养基+10%胎牛血清
消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA
冻存液:50%胎牛血清,40%DMEM,10%DMSO
培养条件:37℃,5% CO2

 

细胞系构建简介:
慢病毒载体pLV-mCherry-C包装慢病毒后感染293V细胞,用嘌呤霉素筛选得到的mCherry过表达单克隆细胞株。

 

收到细胞的处理:
根据客户所在地及发货季节,我们可能采用干冰运输的冻存细胞或者常温运输的培养瓶细胞两种不同形式发货。收到细胞后根据细胞运输类型采用下面两种方式操作。

 

干冰运输细胞

  1. 37℃水浴融化细胞冻存液,间或摇动冻存管以加速融化过程。待细胞冻存液完全融化后,用70%乙醇消毒细胞冻存管外壁。
  2. 室温200g离心5分钟收集细胞。吸去上清。
  3. 用1ml培养基重悬细胞。
  4. 将细胞接种到6mm培养皿或25cm培养瓶中,补加5ml培养基,37℃ 5%CO2培养。。

 

常温运输细胞:
在显微镜下观察已收到的细胞,根据细胞状态采取不同方法处理。

  1. 如果细胞大部分贴壁且密度不高,则去除细胞原培养基,加入5ml新鲜培养基即可。
  2. 如果细胞大部分贴壁且密度较高,则按照常规方法消化细胞,传代分瓶培养。
  3. 如果细胞脱落较多,采用下面步骤处理:
    1. 将原培养基析出装入50ml离心管。200g离心10分钟。
    2. 去除上清,用5ml培养基重悬细胞,将细胞重悬液接入一新的10cm培养皿培养。
    3. 在原细胞培养瓶中重新添加5ml培养基进行培养。
    4. 第二天视细胞密度和状态,换液或传代。

 

细胞荧光照片:

 

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CG0013说明书


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