实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

Cas9通常被引入细胞系以实现CRISPR–Cas9介导的基因组编辑。作者研究了Cas9表达对细胞的基因组和转录活动遗传和转录活动产生的影响。165对人类癌细胞系及其Cas9表达衍生物的基因表达谱显示，Cas9导入后p53途径的上调，特别是在野生型TP53（TP53-WT）细胞系中。这在mRNA和蛋白质水平上得到了证实。此外，在表达Cas9的细胞系中...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

TALEN 敲除小鼠 P53 基因及 talen 质粒活性验证 验证原理： 将 talen 靶点附近序列从基因组上扩增，克隆到验证质粒中 EGFP 基因上游，与 EGFP 基因融合。 Talen 质粒对与验证质粒共转染 293V 细胞，表达的 talen 蛋白对验证质粒上靶点序列进行切割，造成 EGF...