一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒（ 制备方法见Cas9慢病毒包装实验 ）。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染...

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在使用G418、潮霉素B或嘌呤霉素筛选稳定细胞系细胞之前，需要先通过梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度。对于一些常见的细胞系，通常可以在资料中找到推荐的药物浓度。例如Hela细胞用400 g/ml的G41或1 g/ml的嘌呤霉素进行稳定细胞株筛...