一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒（ 制备方法见Cas9慢病毒包装实验 ）。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染...

原理 分析转化的功能和表达需要 DNA 稳定转染至宿主细胞染色体。外源基因进入细胞后，部分能够通过细胞质进入细胞核内，根据细胞类型，至多 80 ％的进入核内的外源 DNA 得到瞬时表达。极少数情况下，进入细胞的外源 DNA 通过系列非同源性分子间重组核连接，...

骨髓间充质干细胞作为种子细胞存组织工程等领域应用广泛,建立稳定的分离培养体系和统一鉴定标准尤为重要.目的:以不同方法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,并进行细胞形态学观察、表面标志物鉴定及多向分化能力检测.设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于...

稳定细胞系构建 服务内容 1、基于TALEN技术的靶向基因敲除细胞系构建 2、基于TALEN技术的靶向基因敲入细胞系 3、基于慢病毒的稳转过表达细胞系构建 4、基于慢病毒的稳定沉默抑制细胞系构建 基本原理： 基于TALEN技术，利用TALEN靶向基因酶切的原理，将靶向基...

在使用G418、潮霉素B或嘌呤霉素筛选稳定细胞系细胞之前，需要先通过梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度。对于一些常见的细胞系，通常可以在资料中找到推荐的药物浓度。例如Hela细胞用400 g/ml的G41或1 g/ml的嘌呤霉素进行稳定细胞株筛...

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