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载体特性
类型:雌激素报告慢病毒载体
基因启动子:estrogen receptor responsive promoter
报告基因:Luciferase
真核细胞筛选抗性:Puromycin
原核抗性:Ampicillin
pLV-ERE-Luci载体通过报告基因Luciferase检测雌激素受体激活。该载体的ERE启动子由多个雌激素受体反应元件和Minimal启动子组成。雌激素受体激活将启动Luciferase蛋白表达。
pLV-ERE-Luci载体与包装载体pH1和pH2(货号KLV3500)的配合可以生产慢病毒。该载体主要用于构建和筛选雌激素报告稳定细胞株。该载体配合雌激素受体表达载体pLV-ESR2-Hygro(VL4107A),可以在不表达雌激素受体的细胞中工作。
使用步骤简介
包装慢病毒→慢病毒感染目的细胞株→筛选出雌激素报告基因稳转细胞株→通过稳转细胞株进行研究
使用说明
本产品提供质粒小提产物,约3-5ug质粒。不能直接用于转染实验。收到产品后请转化大肠杆菌感受态,制备转染级质粒。并及时冻存质粒和菌种。
转化时采用含Ampicillin 50-60ug/ml的LB平板及培养基。
真核筛选抗性为puromycin,使用浓度一般为0.5-10ug/ml。不同细胞株的最佳筛选浓度差别很大,需要在实验前通过预实验确定。实验方法请见:http://www.inovogen.com/news/2012/0423/115.html。
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