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货号:CY015 Tubulin-mCherry 293细胞稳定表达人α-Tubulin基因和mCherry的融合蛋白,通过红色荧光蛋白标记细胞的微管蛋白,可用于细胞结构观察或者基因的亚细胞定位研究。
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细胞来源:HEK293V细胞(人胚肾细胞)
表达蛋白:Tublin-mCherry融合蛋白
构建载体:pLV-Tubulin-mCherry(货号VL3509)
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:DMEM (gibco:12100-061)高糖培养基+10%FBS,双抗
细胞培养方法:
为保持细胞良好的状态,HEK293V细胞密度达50%时就需要传代。由于细胞生长迅速,一般2-3天需传代一次。
注意:及时传代对保持细胞状态极为重要。
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:4到1:5接种细胞。
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