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货号:CY012 MEM-EGFP稳转细胞株(Hela)表达人GAP43基因(GeneID:2596)N端20 AA信号肽和EGFP的融合蛋白,该细胞稳定表达带有细胞膜定位信号肽的EGFP荧光蛋白,细胞膜呈现绿色荧光。该细胞株可用于细胞膜标记相关实验或者细胞膜定位基因的研究。
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细胞特性:
细胞来源:Hela细胞(人子宫颈癌细胞)
表达蛋白:细胞膜定位EGFP蛋白
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:MEM (含NEAA)(gibco 货号:41500083)培养基+10%FBS,双抗
细胞培养方法:
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:4到1:5接种细胞。
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