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货号:CY008 Mito-EGFP-Hela细胞株稳定表达基因COX8A(GeneID:1351)N端信号肽和EGFP的融合蛋白,该细胞稳定表达带有线粒体定位信号肽的EGFP荧光蛋白,细胞膜呈现绿色荧光。该细胞株可用于线粒体标记相关实验或者线粒体定位基因的研究。
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细胞特性:
细胞来源:Hela(人子宫颈癌细胞)
表达蛋白:线粒体定位EGFP蛋白
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:MEM (含NEAA)(gibco 货号:41500083)培养基+10%FBS,嘌呤霉素 1ug/ml
消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA
冻存液:50%胎牛血清,40%DMEM,10%DMSO
培养条件:37℃,5% CO2
细胞培养方法:
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:4到1:5接种细胞。
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