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产品说明: | NFAT(Nuclear Factor of Activated T cells)转录因子家族在免疫反应中对多种细胞因子的表达有重要作用,也参与了肿瘤免疫、心肌功能调控、凋亡等多种功能。包括钙调蛋白和蛋白激酶C在内的多种信号通路都可以通过NFAT发挥作用。 NFAT-RE-EGFP稳转细胞株采用293V细胞株构建,通过慢病毒稳定转入NFAT控制表达的EGFP基因。NFAT激活启动EGFP表达,通过检测EGFP荧光可以灵敏地反应NFAT通路的状态。
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产品资料: | 品名:NFAT-RE-EGFP稳转细胞株(293) 货号:CS002
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细胞形态: |
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产品包装及发货: | 1 x 10^6/支,2支。冻存细胞,干冰发货。货期1~2周。
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培养方法: | DMEM ( g i b c o 货号: 1 2 1 0 0 - 0 6 1 )高糖培养基+10%FBS,5% CO2,37℃培养。3天左右传代1次,1:3~1:5传代。
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构建方法: | 将慢病毒载体pLV-NFAT-RE-EGFP包装为慢病毒,转染293V细胞,用嘌呤霉素进行初步筛选。将筛选后的细胞进行单克隆细胞培养,检测克隆株的EGFP本底表达及对NFAT信号通路激活的反应性。最后得到能灵敏反应NFAT激活的克隆株。
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细胞质量检测: | 1、细胞形态正常,贴壁生长。增殖良好。 2、PMA+Ionomycin刺激NFAT信号通路,EGFP荧光表达明显增高。
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PMA+Ionomycin刺激实验结果: | NFAT-RE-EGFP稳转细胞株功能检测实验结果。细胞用PMA 5ng/ml+Ionomycin 1uM刺激24小时,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达。
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