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重组载体构建服务
服务编号:W3202
采用同源重组法进行哺乳动物细胞基因编辑时,需要重组修复模板。修复模板可以以PCR产物或质粒的形式提供。采用质粒提供的修复模板可以在细胞中存在更长时间,提高修复成功率。
我们的修复载体pHR-sfGFP-Puro载体含GFP和puromycin抗性基因双重筛选标签,可以很方便地用流式细胞仪或者抗生素筛选出阳性细胞。载体中有两个LoxP位点。当基因敲除成功细胞筛选出来后,转入CRE表达载体可以将筛选标签清除。
pHR-sfGFP-Puro载体与SL无缝克隆技术结合,可以一次克隆完成5’端和3’端重组臂的组装。稍加设计,甚至可以同时完成敲入基因的组装。
一般重组载体构建从PCR扩增重组臂到两次克隆,实验周期至少需要3-4周。如果需要基因合成,实验周期则长达一个月以上。 通过我们的克隆技术,两个重组臂克隆仅需1周时间,即使加上基因合成,全部实验时间也仅需3周。
服务优点
一次克隆完成两个重组臂构建
与基因合成服务无缝衔接
重组载体设计到构建全程服务
设计灵活,可同时构建敲入基因
与Cas9哺乳动物细胞重组编辑系统结合,实现高效基因编辑
工作原理
相关服务及产品
服务编号 | 服务名称 |
---|---|
W3203 | sgRNA表达载体组装服务 |
W1001 | 基因合成服务 |
W3201 | 哺乳动物细胞基因编辑服务 |
CR2002 | SL重组载体构建试剂盒 |
CR2102 | 哺乳动物细胞Cas9基因编辑试剂盒 |
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