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名称:BL21(DE3) -(pagP+msbB)双敲除菌株
货号:EC1045
规格:200ul 甘油菌,2 支
保存:-80℃
抗性:无
培养基:LB
培养温度:37℃
简介:
本产品是用 Red 系统敲除大肠杆菌 BL21(DE3)中 pagP 与 msbB 基因得到的双基因敲除菌株。实验中引入的质粒和抗性均已清除,培养条件与野生型 BL21(DE3)一致。
基因型:
E.coli str.BF–ompT gal dcm lon hsdSB (rB–mB–)λ(DE3[lacIlacUV5-T7p07 ind1sam7 nin5])[malB+]K-12(λS)pagP–msbB-
敲除基因 ID:946360(pagP; ECK0615; ybeG;crcA)
敲除基因 ID:945143(msbB; ECK1856; mlt; lpxM; waaN)
基因组 PCR 鉴定引物序列:
pagP -5HR-JD-F: atggtgttagctgcggct
pagP -3HR-JD-R: aactctacgcgctgacct
msbB -5HR-JD-F: ttgcgcaagattctggtga
msbB -3HR-JD-R: cgtacgctgaacctgact
PCR 产物大小:
BL21(DE3) - (pagP+msbB)双敲除菌株(pagP):681 bp
BL21(DE3) -野生型菌株(pagP):1242 bp
BL21(DE3) - (pagP+msbB)双敲除菌株(msbB):828 bp
BL21(DE3) -野生型菌株(msbB):1668 bp
操作说明:
1、本品包含两份甘油菌,使用时甘油菌可以不用完全溶解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全溶解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2、为保证菌种纯正,避免其他细菌污染,尽量先平板划线,然后再挑取单克隆菌落进行后续操作。