CRISPR dCas9转录激活服务

CRISPR dCas9 SAM技术

CRISPR SAM（synergistic activation mediator）采用切割活性缺失的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白，加上能与RNA结合蛋白MS2的sgRNA2.0，特异性识别并结合目标基因的启动子。MS2蛋白上连接p65和HSF1转录激活蛋白。通过多种转录激活蛋白的协同作用，能更好的模拟细胞内转录激活（图1，CRISPR/Cas9 SAM原理）。研究表明，单一位点SAM的转录激活效果远高于多个位点dCas9-VP64的转录激活效果。

图1、CRISPR/Cas9 sam原理图（来自Konermann，et al. Nature, 2015）

CRISPR SAM组成：

• pLV-dCas9-VP64：慢病毒载体，表达无DNA酶的dCas9与转录激活因子VP64的融合蛋白。与sgRNA结合并产生转录激活作用。

• pLV-MPH：慢病毒载体，表达MS2/P65/HSF1融合蛋白。与sgRNA结合并协同产生转录激活作用。

• pLV-SG20：表达改造的sgRNA，与DNA上靶点特异结合，并且结合dCas9及MS2蛋白。

载体图谱：











我们提供什么？

• CRISPR SAM慢病毒载体：pLV-dCas9-VP64、pLV-MPH、pLV-SG20。

• 可直接转染细胞的慢病毒：dCas9-VP64表达慢病毒、MPH表达慢病毒、SG20表达慢病毒。

• dCas9-VP64-MPH稳定表达细胞株。

• 已验证的转录激活sgRNA表达载体。

• 特定基因转录激活细胞株。

 

• pLV-SG20载体构建服务：CRIPSR SAM靶点设计及载体构建。

• 目标基因转录激活稳定细胞株构建服务。

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