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DNA识别域


TALEN(Transcription Activator-Like Effector Nuclease) 是一种人工改造的限制性内切酶,是由一个DNA识别域和一个核酸内切酶的切割域(FokⅠ)构成。DNA识别域是由一些非常保守的重复氨基酸序列模块组成,每个模块一般由34个氨基酸(aa)组成,其中第12,13位氨基酸种类可变且决定了该模块识别靶向位点的特异性。通过DNA识别域结合到靶位点上,FokI的切割域形成二聚体,可以特异性的切断目标基因,损伤后的DNA在非同源末端连接修复过程中,会由于碱基的随机增减造成目标基因功能缺失。

 

由于DNA识别域中每个模块可以与单碱基发生特异性结合,因此理论上可以任意选择靶DNA序列进行改造,并且特异性更高,更利于人工设计。如果说锌指核酸酶(Zinc-fingernucleases,ZFN)技术的出现促使基因组靶向修饰技术向前迈进了一大步,那么TALEN技术的出现更是提高了基因打靶效率、增加了可基因修饰物种的范畴,使基因打靶技术趋于完善。


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