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SacB基因与大肠杆菌蔗糖致死筛选

SacB基因是来自枯草芽孢杆菌的糖代谢相关基因，其作用为将蔗糖转变为果聚糖。由于大肠感觉缺乏处理果聚糖的基因，在大肠杆菌中表达SacB基因，会导致SacB基因的产物果聚糖在大肠杆菌中聚集，导致细菌死亡。因此，无需其他条件，仅需在培养基中添加10%蔗糖，就能实现对大肠杆菌的筛选。

SacB基因的应用举例如下

Crispr Cas9 系统在微生物的基因敲除，定点插入等普遍应用，在大肠杆菌中也不例外，如下我们可以看到，这是在大肠杆菌中进行敲除时采用的Cas9质粒，在该质粒中存在sacB基因，这个基因的存在是为了干什么呢？

其实，这个Cas9，SgRNA, 以及donor DNA 在导入大肠杆菌完成重组后，如何做到把含有Cas9的质粒进行消除呢，这就是一个问题。

这个时候就可以在质粒上添加sacB基因，通过在培养基中添加蔗糖，由于蔗糖存在时，SacB基因编码的蛋白可以将蔗糖转化成果糖，而果糖的积累对大肠杆菌产生毒性，在这种压力的作用下，能够丢掉质粒的菌株便可存活，而无法丢掉质粒的，就死亡了。