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pLV-EGFP-2A单独荧光标签慢病毒载体 (VL3401)

载体特性
类型：慢病毒基因过表达载体
基因启动子：CMV IE promoter
荧光标签：EGFP
真核细胞筛选抗性：Puromycin
原核抗性：Ampicillin
 

      pLV-EGFP-2A载体是基于HIV1的慢病毒基因过表达载体。该载体的多克隆位点位于EGFP基因下游，在CMV启动子驱动下表达目的基因和EGFP 的mRNA，翻译为蛋白后，蛋白中的2A序列将目的蛋白和EGFP蛋白切开，从而实现两个蛋白在同一启动子下表达，单独发挥作用。pLV-EGFP-2A载体可以通过EGFP蛋白表达量监测病毒包装及目的蛋白表达，而EGFP与目的蛋白的分开表达可有效避免EGFP标签对目的蛋白功能的影响。PGK启动子驱动表达Puromycin抗性基因。利用本载体包装的慢病毒将表达Puromycin抗性基因，可以方便地使用Puromycin筛选出稳定过表达目的基因的细胞。

     pLV-EGFP-2A载体包含了生产慢病毒所必须的病毒原件以及提高病毒滴度及基因表达效率的原件。载体结构紧凑，在保证产生高滴度病毒的同时，载体对外源基因片段的容量达到3kb，多数哺乳动物基因都可以在pLV-EGFP-2A中成功表达。

使用说明
     pLV-EGFP-2A载体用于在包括原代培养细胞在内的各种哺乳动物细胞中稳定表达外源基因和Puromycin抗性基因。pLV-EGFP-2A载体与包装载体共转染HEK293T细胞后（包装体系货号KLV3501和KLV3502），产生高滴度复制缺陷的慢病毒颗粒，可以直接用于感染细胞或者纯化浓缩后感染细胞。

原核培养特性
    pLV-EGFP-2A载体为高拷贝质粒，带有氨苄抗性基因，可以在含有100ug/ml氨苄抗生素的LB培养基中增殖。宿主菌可以采用DH5a，JM109，TOP10等常见大肠杆菌菌种。

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VL3401说明书

注意：
本载体中的部分序列来自已公布数据库，本公司没有对该载体完全测序。