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货号:CY009 Golgi-EGFP稳定表达293细胞株表达人B4GALT1基因(GeneID:2683)N端82 AA信号肽和EGFP的融合蛋白,该细胞稳定表达带有高尔基体定位信号肽的EGFP荧光蛋白,细胞膜呈现绿色荧光。该细胞株可用于高尔基体标记相关实验或者高尔基体定位基因的研究。
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细胞特性:
细胞来源:HEK293V细胞(人胚肾细胞)
表达蛋白:Golgi定位EGFP蛋白
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:DMEM ( g i b c o 货号: 1 2 1 0 0 - 0 6 1 )高糖培养基+10%FBS,双抗
细胞培养方法:
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:4到1:5接种细胞。
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