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货号:CY005 ER-EGFP稳定表达293细胞株表达钙网蛋白(GeneID:811)N端17AA信号肽和EGFP的融合蛋白,定位于细胞内质网,内质网为绿色荧光蛋白标记,可用于内质网定位实验或者内质网定位基因的研究。
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细胞特性:
细胞来源:HEK293V细胞(人胚肾细胞)
表达蛋白:内质网定位EGFP蛋白
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:DMEM ( g i b c o 货号: 1 2 1 0 0 - 0 6 1 )高糖培养基+10%FBS,双抗
细胞培养方法:
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:4到1:5接种细胞。
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