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清华大学医学院采用我公司Cas9蛋白表达细胞株研究成功高通量芯片

标签:发布时间:2018-04-26 07:51:57


随着CRIPSR/Cas9技术的应用日益广泛,现在已经有一些sgRNA文库出现,可以对靶基因进行高通量敲除和编辑。这就需要一种能够高效转染和检测各种细胞株的实验平台。现阶段的筛选技术主要在96孔板或者384孔板进行,筛选的通量较低,而且耗费大量昂贵的试剂。化学转化法对不同的细胞需要采用不同的转染试剂和条件,限制了其对原代细胞等难转染细胞的应用。

 
 作者设计构建能对细胞进行高通量电转的体系,可以高效、精确、定量地大批量转染各种细胞株。为高通量采用CRISPR/Cas9技术进行基因功能研究提供了技术平台。 


 文中,作者采用我公司的293T-Cas9稳转细胞株(货号C1203)和细胞内切割活性验证载体pTYNE(货号CR1011),验证了高通量细胞芯片电转系统可以用于CRISPR/Cas9基因编辑。

pTYNE载体在293T-Cas9细胞中被切割后发出明亮绿色荧光(from Bian, S. et al. High-throughput in situ cell electroporation microsystem for parallel delivery of single guide RNAs into mammalian cells. Sci. Rep. 7, 42512; doi: 10.1038/srep42512 (2017).


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