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原核表达载体构建服务
大肠杆菌表达载体构建服务专属特惠服务:
凡订购大肠杆菌表达载体构建服务,免费赠送表达菌种转化服务!可选的菌种包括:BL21、BL21(DE3)、BL21(DE3)-pLysS、Arctiv express(DE3)、SHuffle T7、Rosetta(DE3)、Origami(DE3)
服务特点:
1、专业技术,精准构建
* 经验丰富的分子生物学团队,精通各类克隆技术(无缝克隆/Gibson Assembly、酶切连接、TA克隆、TOPO克隆、PCR克隆等)。
* 复杂载体构建专家:轻松应对多片段组装、点突变、启动子/标签替换、复杂元件插入等挑战。
* 高成功率保障:严格优化的实验流程与质控体系,确保载体构建准确无误。
2、 灵活定制,满足个性需求:
* 根据您的具体需求(目标基因、宿主菌、表达条件、纯化需求)**量身设计**最佳载体方案。
* 复杂载体构建专家:轻松应对多片段组装、点突变、启动子/标签替换、复杂元件插入等挑战。
* 支持多种**启动子**(T7, lac, tac, araBAD等)、**标签**(His-tag, GST, MBP, SUMO, FLAG等)、**抗性标记**(Amp, Kan, Cm, Tet等)及特殊元件(信号肽、蛋白酶切位点等)的组合。
3、快速交付,省时省心:
* 高效流程,显著缩短项目周期。。
* 提供**加急服务选项**,满足您紧迫的时间要求。
* 从基因合成/引物设计到最终质粒交付,提供**一站式服务**,免除您多环节协调的烦恼。
服务流程:
1、需求沟通与方案设计: 您提供目标基因信息及载体要求,我们共同确认最优构建策略。
2. 基因合成/引物订购(如需): 提供便捷的基因合成或引物设计订购服务。
3. 分子克隆构建: 专业团队执行克隆实验。
4. 阳性克隆筛选与鉴定: 过菌落PCR、酶切鉴定初步筛选。
5. 测序验证: 对阳性克隆进行测序,确保序列准确。
6. 质粒制备与交付: 制备高纯度质粒DNA,附带详细构建报告(含测序结果)及电子版载体图谱。
具体基因价格和工作周期请咨询我们(023-67630383,tech@inovogen.com)
原核表达常用启动子
启动子 (Promoter) | 主要用途 | 描述 | 表达特性 | 其他注意事项 |
T7 | 体外转录/通用表达 | T7噬菌体启动子 | 组成型表达,需T7 RNA聚合酶 | 用于体外转录时,根据启动子与基因的相对方向驱动正义链或反义链转录 |
T7lac | 高水平基因表达 | T7启动子 + lac操纵子 | 未诱导时基底表达极低,需T7 RNA聚合酶(受lac操纵子调控),可用IPTG诱导 | 常见于pET载体,lac操纵子提供严格调控,可通过诱导剂浓度精细调节表达水平 |
Sp6 | 体外转录/通用表达 | Sp6噬菌体启动子 | 组成型表达,需SP6 RNA聚合酶 | SP6聚合酶具有高持续性,方向决定转录产物为正义/反义链 |
araBAD | 通用表达 | 阿拉伯糖代谢操纵子启动子 | 阿拉伯糖诱导,葡萄糖存在时受分解代谢物阻遏,岩藻糖可竞争性抑制 | 表达较弱(常见于pBAD载体),基底表达低但不易通过诱导剂浓度精细调控 |
trp | 高水平基因表达 | 大肠杆菌色氨酸操纵子启动子 | 可阻遏型 | 高色氨酸水平时关闭表达 |
lac | 通用表达 | lac操纵子启动子 | 无阻遏蛋白(lacI/lacIq)时为组成型,IPTG或乳糖可诱导 | 渗漏型启动子,表达较弱。lacIq突变使阻遏蛋白表达提高10倍,可通过诱导剂浓度调节表达 |
Ptac | 通用表达 | lac/trp杂合启动子 | 调控方式同lac启动子 | 含trp的-35区和lac的-10区,调控严格,表达优于lac,可通过诱导剂浓度精细调节 |
pL | 高水平基因表达 | λ噬菌体启动子 | 温度调控型 | 常与温度敏感型阻遏蛋白cI857联用 |
T3 | 体外转录/通用表达 | T3噬菌体启动子 | 组成型表达,需T3 RNA聚合酶 | 方向决定正义/反义链转录 |
相关服务
RNA干扰 基因合成 基因克隆 慢病毒 稳定细胞株筛选服务 蛋白表达服务