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货号:CG009 16HBE-EGFP细胞株是用表达EGFP的慢病毒感染16HBE细胞,经嘌呤霉素筛选得到的多克隆细胞株。细胞稳定表达EGFP荧光蛋白,培养时无需抗生素维持。可作为慢病毒感染实验中的对照细胞株使用。 |
细胞特性:
细胞来源:16HBE(人支气管上皮细胞)
细胞类型:EGFP稳定过表达多克隆细胞株
表达蛋白:EGFP
构建载体:pLV-EGFP-C(VL3215)
筛选抗生素:嘌呤霉素
培养基:DMEM ( g i b c o 货号: 1 2 1 0 0 - 0 6 1 )高糖培养基+10%FBS
构建方法:
慢病毒载体pLV-EGFP-C包装为慢病毒,转染16HBE细胞,经嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP荧光蛋白的多克隆细胞株。
细胞培养方法:
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:3到1:5接种细胞。
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