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pLV-sfGFP(2A)Puro Cat. No. VL3408
载体特性
类型:慢病毒基因过表达载体
基因启动子:CMV IE promoter
荧光标签:sfGFP
真核细胞筛选抗性:Puromycin
原核抗性:Ampicillin
pLV‐sfGFP(2A)Puro 载体是基于HIV1 的慢病毒基因过表达载体,采用CMV 启动子启动目的基因的表达。通过将sfGFP 基因放在不同的启动子,该载体保留了荧光标签在病毒包装检测中的便利性,也避免 了融合标签蛋白对目的基因功能产生影响sfGFP:sfGFP 是EGFP 的突变体。sfGFP 的发射光和激发光谱与EGFP 一样。由于sfGFP 比EGFP 能更好地折叠为正确蛋白,sfGFP 亮度是EGFP 亮度的1.5 倍。
使用说明
pLV‐sfGFP(2A)Puro 载体用于在包括原代培养细胞在内的各种哺乳动物细胞中稳定表达外源基因和Puromycin 抗性基因。pLV‐EGFP(2A)Puro 载体与包装载体共转染293V细胞后(包装体系货号KLV3501和KLV3502),产生高滴度复制缺陷的慢病毒颗粒,可以直接用于感染细胞或者纯化浓缩后感染细胞。
原核培养特性
pLV‐sfGFP(2A)Puro 载体为高拷贝质粒,带有氨苄抗性基因,可以在含有100 μg/ml 氨苄抗生素的LB 培
养基中增殖。宿主菌可以采用DH5α,JM109,TOP10 等常见大肠杆菌菌种。