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哺乳动物细胞Cas9基因编辑试剂盒

   为方便采用CRISPR/Cas9技术对哺乳动物细胞进行基因编辑，我们提供了两种哺乳动物细胞基因编辑试剂盒。Cas9动物细胞无痕基因编辑试剂盒SL和Cas9动物细胞重组基因编辑试剂盒HR。
SL试剂盒可以实现无痕精确基因编辑，可以通过邻端接和或者重组进行基因编辑，编辑效率低一些。

HR试剂盒采用重组修复法插入抗性基因筛选出基因编辑成功细胞，成功率高。抗性基因在编辑完成后可以通过Cre/LoxP系统清除。清除后残留一个LoxP位点。

表1、两种哺乳动物细胞基因编辑试剂盒比较

Cas9动物细胞无痕基因编辑试剂盒SL

货号：CR2101

产品内容：
pCas9/sgRNA-Puro vector
CL cloning Enzyme Mix
Sg Template
Sg Primers

该试剂盒的pCas9/sgRNA-Puro同时表达Cas9蛋白和sgRNA。含有CRISPR靶点的sgRNA表达框通过试剂盒中配备的克隆酶连接到载体中，多个sgRNA表达框可以一步完成。可以完成的基因编辑方式包括：NHEJ（nonhomologous end-joining）造成的基因定点缺失突变、HR（Homologous Recombination）完成的基因敲出、敲入、定点突变。
该试剂盒仅需构建一个载体，使用方便。

产品特点：
* 一步完成多靶点克隆
* 无痕基因编辑
* 抗性基因筛选提高阳性率

Cas9动物细胞重组基因编辑试剂盒HR

货号：CR2102

产品内容：
pCas9/sgRNA4 vector
CL cloning Enzyme Mix
Sg Template
Sg Primers
pHR-sfGFP-Puro vector
SE cloning Enzyme Mix
Cre Expression vector（可选）

Cas9动物细胞基因编辑试剂盒HR 主要通过同源重组完成基因编辑。试剂盒中的pCas9/sgRNA4表达的Cas9蛋白和sgRNA定点切割细胞基因组DNA。pHR-sfGFP-Puro载体通过同源重组修复DNA断裂点。修复成功的细胞表达sfGFP荧光和puromycin抗性基因，从而可以筛选出阳性细胞。筛选完成后，筛选标签可以通过Cre/LoxP系统去除。
pCas9/sgRNA4和 pHR-sfGFP-Puro的构建均可一次完成，极大节省了实验时间。该试剂盒基因编辑成功率高，适合进行大片段基因敲除、敲入、替换等。由于编辑后残留一个LoxP位点，该试剂盒不适合用于精确的定点突变基因编辑实验。

产品特点：
* 一步完成多靶点克隆
* 一步完成重组载体构建
* 基于同源重组的高阳性率筛选
* Cre/LoxP清除筛选标记