微信扫一扫
下载说明书
哺乳动物细胞Cas9基因编辑试剂盒
为方便采用CRISPR/Cas9技术对哺乳动物细胞进行基因编辑,我们提供了两种哺乳动物细胞基因编辑试剂盒。Cas9动物细胞无痕基因编辑试剂盒SL和Cas9动物细胞重组基因编辑试剂盒HR。
SL试剂盒可以实现无痕精确基因编辑,可以通过邻端接和或者重组进行基因编辑,编辑效率低一些。
HR试剂盒采用重组修复法插入抗性基因筛选出基因编辑成功细胞,成功率高。抗性基因在编辑完成后可以通过Cre/LoxP系统清除。清除后残留一个LoxP位点。
|
Cas9动物细胞无痕基因编辑试剂盒SL |
Cas9动物细胞重组基因编辑试剂盒HR |
编辑类型 |
定点突变、基因敲除、基因敲入 |
基因敲除、基因敲入 |
阳性率 |
一般 |
高 |
是否残留标记 |
否 |
残留抗性基因或LoxP位点 |
适用细胞 |
易转染、易培养 |
易转染、易培养 |
标记类型 |
Puromycin |
Puromycin +GFP |
表1、两种哺乳动物细胞基因编辑试剂盒比较
货号:CR2101
产品内容:
pCas9/sgRNA-Puro vector
CL cloning Enzyme Mix
Sg Template
Sg Primers
该试剂盒的pCas9/sgRNA-Puro同时表达Cas9蛋白和sgRNA。含有CRISPR靶点的sgRNA表达框通过试剂盒中配备的克隆酶连接到载体中,多个sgRNA表达框可以一步完成。可以完成的基因编辑方式包括:NHEJ(nonhomologous end-joining)造成的基因定点缺失突变、HR(Homologous Recombination)完成的基因敲出、敲入、定点突变。
该试剂盒仅需构建一个载体,使用方便。
产品特点:
* 一步完成多靶点克隆
* 无痕基因编辑
* 抗性基因筛选提高阳性率
货号:CR2102
产品内容:
pCas9/sgRNA4 vector
CL cloning Enzyme Mix
Sg Template
Sg Primers
pHR-sfGFP-Puro vector
SE cloning Enzyme Mix
Cre Expression vector(可选)
Cas9动物细胞基因编辑试剂盒HR 主要通过同源重组完成基因编辑。试剂盒中的pCas9/sgRNA4表达的Cas9蛋白和sgRNA定点切割细胞基因组DNA。pHR-sfGFP-Puro载体通过同源重组修复DNA断裂点。修复成功的细胞表达sfGFP荧光和puromycin抗性基因,从而可以筛选出阳性细胞。筛选完成后,筛选标签可以通过Cre/LoxP系统去除。
pCas9/sgRNA4和 pHR-sfGFP-Puro的构建均可一次完成,极大节省了实验时间。该试剂盒基因编辑成功率高,适合进行大片段基因敲除、敲入、替换等。由于编辑后残留一个LoxP位点,该试剂盒不适合用于精确的定点突变基因编辑实验。
产品特点:
* 一步完成多靶点克隆
* 一步完成重组载体构建
* 基于同源重组的高阳性率筛选
* Cre/LoxP清除筛选标记